1. Repositório Institucional - Universidade Federal de Uberlândia
2. Instituto de Biotecnologia (IBTEC)
3. TCC - Biotecnologia (Uberlândia)

Document type:	Trabalho de Conclusão de Curso
Access type:	Acesso Aberto
Title:	Expressão e caracterização citotóxica de uma protease clonada da glândula de Bothrops pauloensis
Alternate title (s):	Expression and cytotoxic characterization of a protease cloned from the venom gland of Bothrops pauloensis
Author:	Oliveira, Marília de Freitas
First Advisor:	Rodrigues, Renata Santos
First coorientator:	Lopes, Daiana Silva
First member of the Committee:	Gimenes, Sarah Natalie Cirilo
Second member of the Committee:	Costa, Tassia Rafaella
Summary:	Existem no Brasil duas famílias de serpentes peçonhentas: Elapidae e Viperidae. Dentre as serpentes peçonhentas encontradas no território brasileiro, a espécie Bothrops pauloensis se destaca na região do Triângulo Mineiro. Essa serpente é caracterizada por apresentar aparelho inoculador de peçonha, que quando inoculada na presa leva a diversas alterações no organismo, principalmente no sistema hemostático. Os estudos relacionados ao mecanismo de ação de toxinas da peçonha de serpentes contribuiu para a elaboração de novos fármacos. Diversas toxinas de serpentes foram caracterizadas com a capacidade de inibir a proliferação celular e promover a morte de células tumorais. Entretanto, pouco se sabe sobre o modo de ação de serinoproteases em células tumorais. As serinoproteases de peçonha de serpentes (SVSPs) são glicoproteínas com estrutura semelhante à tripsina e são pouco expressas em peçonhas da espécie B. pauloensis. Dessa forma, o uso de tecnologias como a expressão heteróloga de proteínas possibilita a obtenção de proteína com modificações pós-traducionais e em escala industrial. O objetivo deste trabalho foi realizar a expressão da proteína recombinante (rBpSP-I) de B. pauloensis em Pichia pastoris, a purificação em cromatografia de afinidade em resina de Ni-NTA Superflow e, posteriormente, a caracterização bioquímica e funcional, pelas atividades coagulante, fibrinogenolítica e citotóxica sobre células tumorais (HL-60, HepG2, MCF7) e não tumorais (PBMC). A serinoprotease apresenta enorme potencial biotecnológico, pois apresentou citotoxicidade significativa frente às células tumorais, o que nunca foi descrito na literatura. Além disso, a proteína recombinante não apresentou citotoxicidade significativa às células do PBMC, o que pode sugerir que sua ação seja direcionada a células cancerígenas.
Keywords:	Serinoprotease Proteína recombinante Pichia pastoris Serineprotease Recombinant protein Antitumoral Antitumor
Area (s) of CNPq:	CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::BIOLOGIA MOLECULAR
Language:	por
Country:	Brasil
Publisher:	Universidade Federal de Uberlândia
Quote:	OLIVEIRA, Marília de Freitas. Expressão e caracterização citotóxica de uma protease clonada da glândula de Bothrops pauloensis. 2017. 47 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biotecnologia) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2017.
URI:	https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/21113
Date of defense:	14-Aug-2017
Appears in Collections:	TCC - Biotecnologia (Uberlândia)

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