1. Repositório Institucional - Universidade Federal de Uberlândia
2. Instituto de Genética e Bioquímica (INGEB)
3. TCC - Biotecnologia (Uberlândia)

Document type:	Trabalho de Conclusão de Curso
Access type:	Acesso Aberto
Title:	Métodos de isolamento de dna associado à nucleossomos em espermatozoide de touros
Author:	Borges, Sávio Ferreira
First Advisor:	Beletti, Marcelo Emílio
First member of the Committee:	Filho, Romualdo Morandi
Second member of the Committee:	Gruppi, Luiz Jerônimo Ferreira
Summary:	Durante a espermatogênese a cromatina é reprogramada, onde a maioria dos nucleossomos são substituídos por protaminas. Recentemente, foi descoberto que no genoma espermático existem nucleossomos concentrados em regiões específicas. Porém ainda são necessárias informações sobre essa preservação de nucleossomos em espermatozoide bovino. Metodologias usando DTT, digestão com Nuclease Micrococcal e centrifugação para separar os fragmentos contendo os nucleossomos já são realizadas com espermatozoide de mamíferos, porém alguns resultados são questionáveis. Diante disso, o presente trabalho teve como objetivo avaliar métodos para isolar DNA nucleossomal. Utilizou-se concentrações de Triton X 100 para permeabilizar membranas e o DTT para descondensar a cromatina, Micrococcal e/ou sonicação para fragmentar a cromatina e centrifugação ou imunopreciptação para isolar o DNA nucleossomal. Os resultados indicam que a concentração de Triton X 100 a 3 % e 40 mM de DTT por 120 horas é o método mais eficiente para descondensar e permitir o acesso de macromoléculas na cromatina espermática. A cromatina foi melhor fragmentada com Micrococcal associada a sonicação e o método mais específico para capturar fragmentos de DNA nucleossomal foi o de imunopreciptação com beads magnéticos.
Keywords:	Cromatina Histonas Nucleossomo
Area (s) of CNPq:	CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA::GENETICA ANIMAL
Language:	por
Country:	Brasil
Publisher:	Universidade Federal de Uberlândia
Quote:	BORGES, Sávio Ferreira. Métodos de isolamento de dna associado à nucleossomos em espermatozoide de touro. 2018. 23f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biotecnologia) – Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2018.
URI:	https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/23349
Date of defense:	18-Jul-2018
Appears in Collections:	TCC - Biotecnologia (Uberlândia)

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