1. Repositório Institucional - Universidade Federal de Uberlândia
  2. Instituto de Biotecnologia (IBTEC)
  3. TCC - Biotecnologia (Uberlândia)
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dc.creatorBorges, Sávio Ferreira-
dc.date.accessioned2018-12-17T16:12:57Z-
dc.date.available2018-12-17T16:12:57Z-
dc.date.issued2018-07-18-
dc.identifier.citationBORGES, Sávio Ferreira. Métodos de isolamento de dna associado à nucleossomos em espermatozoide de touro. 2018. 23f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biotecnologia) – Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2018.pt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.ufu.br/handle/123456789/23349-
dc.languageporpt_BR
dc.publisherUniversidade Federal de Uberlândiapt_BR
dc.rightsAcesso Abertopt_BR
dc.subjectCromatinapt_BR
dc.subjectHistonaspt_BR
dc.subjectNucleossomopt_BR
dc.titleMétodos de isolamento de dna associado à nucleossomos em espermatozoide de tourospt_BR
dc.typeTrabalho de Conclusão de Cursopt_BR
dc.contributor.advisor1Beletti, Marcelo Emílio-
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/1895300906751714pt_BR
dc.contributor.referee1Filho, Romualdo Morandi-
dc.contributor.referee2Gruppi, Luiz Jerônimo Ferreira-
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/2073288696706912pt_BR
dc.description.degreenameTrabalho de Conclusão de Curso (Graduação)pt_BR
dc.description.resumoDurante a espermatogênese a cromatina é reprogramada, onde a maioria dos nucleossomos são substituídos por protaminas. Recentemente, foi descoberto que no genoma espermático existem nucleossomos concentrados em regiões específicas. Porém ainda são necessárias informações sobre essa preservação de nucleossomos em espermatozoide bovino. Metodologias usando DTT, digestão com Nuclease Micrococcal e centrifugação para separar os fragmentos contendo os nucleossomos já são realizadas com espermatozoide de mamíferos, porém alguns resultados são questionáveis. Diante disso, o presente trabalho teve como objetivo avaliar métodos para isolar DNA nucleossomal. Utilizou-se concentrações de Triton X 100 para permeabilizar membranas e o DTT para descondensar a cromatina, Micrococcal e/ou sonicação para fragmentar a cromatina e centrifugação ou imunopreciptação para isolar o DNA nucleossomal. Os resultados indicam que a concentração de Triton X 100 a 3 % e 40 mM de DTT por 120 horas é o método mais eficiente para descondensar e permitir o acesso de macromoléculas na cromatina espermática. A cromatina foi melhor fragmentada com Micrococcal associada a sonicação e o método mais específico para capturar fragmentos de DNA nucleossomal foi o de imunopreciptação com beads magnéticos.pt_BR
dc.publisher.countryBrasilpt_BR
dc.publisher.courseBiotecnologiapt_BR
dc.sizeorduration23pt_BR
dc.subject.cnpqCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA::GENETICA ANIMALpt_BR
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