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Document type: Tese
Access type: Acesso Aberto
Title: Aspectos clínicos, moleculares, sorológicos e neurofisiológicos no diagnóstico precoce da neuropatia hansênica
Author: Santos, Diogo Fernandes dos
First Advisor: Goulart, Isabela Maria Bernardes
First member of the Committee: Marques Junior, Wilson
Second member of the Committee: Garbino, José Antônio
Third member of the Committee: Morales, Nívea de Macedo Oliveira
Fourth member of the Committee: Ferreira, Marcelo Simão
Summary: Introdução: O longo período de incubação da hanseníase, seus sinais e sintomas insidiosos produzem dificuldades em seu diagnóstico e classificação clínica correta. O reconhecimento precoce do comprometimento neural na hanseníase sobretudo em contatos domiciliares com infecção subclínica e na forma neural primária, em que os achados clínicos e laboratoriais clássicos da doença estão, por definição, ausentes, representa um grande desafio na prática clínica. Objetivos: Esta tese foi subdividida em dois estudos, cujos objetivos foram caracterizar os aspectos clínicos, moleculares, sorológicos e neurofisiológicos no diagnóstico precoce da neuropatia hansênica, em pacientes com suspeita de hanseníase neural primária (HNP) e em contatos domiciliares com infecção subclínica. Metodologia: No primeiro estudo, foram recrutados 70 pacientes com diagnóstico de HNP e, no segundo estudo, 175 contatos domiciliares soropositivos (CDSP), definido como infecção subclínica e um grupo controle de 35 contatos domiciliares soronegativos (CDSN), acompanhados em um centro de referência nacional em hanseníase do Brasil, no período de 2014 a 2016. Todos os indivíduos foram submetidos a uma avaliação clínica, laboratorial e neurofisiológica. A descrição metodológica detalhada e a análise estatística específica é descrita em cada estudo separadamente. Resultados: No estudo 1, 61.4% (43/70) dos pacientes foram claramente sintomáticos e neste grupo todos apresentaram um comprometimento periférico assimétrico, predominantemente sensitivo. A presença de espessamento neural foi observada em 58.6% (41/70). A avaliação eletroneuromiográfica evidenciou a presença de mononeuropatia em 51.4% (36/70). 52.9% (37/70) apresentaram positividade ao teste ELISA anti-PGLl e 78.6% (55/70) na detecção de DNA de M. leprae por PCR em tempo real (qPCR) no raspado intradérmico. Os pacientes com padrão de uma mononeuropatia múltipla demonstraram menores índices de ELISA anti-PGL-1 (p=0.0006), maior frequência de espessamento neural (p=0.0008) e de sintomas sensitivos (p=0.01), quando comparados ao grupo com mononeuropatia. A detecção de DNA de M leprae por qPCR na biópsia de nervo periférico foi positiva em 60.8% (17/28) dos casos. No estudo 2, a análise da qPCR em sangue periférico foi positiva em 40.6% (71/175) dos CDSP e em apenas 8.6% (3/35) dos CDSN (p=0.0003). Na avaliação do raspado intradérmico, 4% (7/175) dos CDSP apresentaram baciloscopia positiva e 47.4% (83/175) apresentaram positividade na detecção de DNA de M. leprae por qPCR. No grupo CDSN, todos apresentaram baciloscopia negativa e apenas 17.1% (6/35) apresentaram qPCR de raspado positiva (p=0.0009). Na avaliação eletroneuromiográfica, 31.4% (55/175) dos CDSP apresentaram sinais de comprometimento neural e no grupo CDSN 13.3% (4/35) (p=0.0163). A presença de espessamento neural conferiu uma chance 2.94 vezes maior de alterações na eletroneuromiografia (ENMG) (OR, 2.94; p=0.0031). O grupo CDSP apresentou uma chance 4.04 maior de comprometimento neural (OR, 4.04; p=0.020). A positividade da qPCR em sangue periférico também conferiu uma maior chance de comprometimento neural (OR, 2.08; p=0.028). A presença de uma ou mais cicatriz vacinai pela BCG conferiu uma proteção para a presença de dano neural (OR, 0.41; p=0.044). Conclusão: No estudo 1, a utilização de ferramentas sorológicas, moleculares e neurofisiológicas em pacientes com suspeita de HNP, contribuiu não apenas com o diagnóstico precoce, mas também para uma classificação clínica correta e tratamento adequado, prevenindo sequelas. Por isso, propomos uma nova recomendação para o diagnóstico de HNP, através da implementação de métodos mais específicos e sensíveis, objetivando tornar esta condição menos subdiagnosticada. No estudo 2, o monitoramento anual dos contatos domiciliares por meio do exame clínico e avaliação sorológica (ELISA anti-PGLl) por pelo menos 5-7 anos, demonstrou que a soropositividade confere uma maior chance de comprometimento neural periférico avaliado pela ENMG e desenvolvimento de formas multibacilares. O uso combinado dos três ensaios (ELISA anti- PGLl, qPCR de sangue periférico e cicatriz de BCG) pode identificar indivíduos com alto risco de desenvolver neuropatia hansênica, não só indicando o início precoce do tratamento naqueles cujo diagnóstico é confirmado pela detecção de DNA de M. leprae em qPCR de raspado intradérmico e/ou ENMG alterada, mas também justificando a quimioprofilaxia naqueles que ainda não apresentam evidências clínicas ou neurofisiológicas de comprometimento neural.
Abstract: Introduction: The long incubation period of leprosy, its insidious symptoms and signs produce difficulties in its diagnosis and correct clinical classification. Early recognition of neural impairment in leprosy - especially in household contacts with subclinical infection and in the primary neural form, in which the classic laboratory and clinical findings of the disease are, by definition, absent - represents a great challenge in clinical practice. Objectives: This thesis was subdivided into two studies, whose objectives were to characterize the clinical, molecular, serological and neurophysiological aspects in the early diagnosis of leprosy neuropathy, in patients with suspected primary neural leprosy (PNL) and household contacts with subclinical infection. Methodology: In the first study, 70 patients with a diagnosis of PNL were recruited and, in the second study, 175 seropositive household contacts (SPHHC), defined as a subclinical infection, and one control group of 35 seronegative household contacts (SNHHC), accompanied in a national leprosy reference center of Brazil, in the period from 2014 to 2016. All the individuals were submitted to a clinical, laboratory and neurophysiological evaluation. A detailed methodological description and specific statistical analysis are provided separately in each study. Results: In Study 1, 61.4% (43/70) of the patients were clearly symptomatic, a group that all presented an asymmetrical peripheral impairment, predominantly sensorial. The presence of neural thickening was observed in 58.6% (41/70). Electroneuromyographic evaluation evidenced the presence of mononeuropathy in 51.4% (36/70); 52.9% (37/70) presented positivity by the anti-PGLl ELISA test and 78.6% (55/70) in M. leprae DNA detection by real time PCR (qPCR) in intradermic smear. The patients with a pattern of multiple mononeuropathy showed lower indices of anti-PGL-1 ELISA (p=0.0006), and higher frequencies of neural thickening (p=0.0008) and sensorial symptoms (p=0.01), when compared to the mononeuropathy group. The qPCR of nerve biopsies was positive in 60.8% (17/28). In Study 2, the qPCR analysis in peripheral blood was positive in 40.6% (71/175) of SPHHC versus only 8.6% (3/35) of SNHHC (p=0.0003). Intradermic smear evaluation found 4% (7/175) of SPHC with positive bacilloscopy while 47.4% (83/175) presented positivity in M leprae DNA detection by qPCR. In the SNHHC group, all presented negative bacilloscopy and only 17.1% (6/35) presented positive smear qPCR (p=0.0009). In electroneuromyographic evaluation, 31.4% (55/175) of SPHHC presented signs of neural impairment versus 13.3% (4/35) in the SNHHC group (p=0.0163). The presence of neural thickening conferred a 2.94- fold higher chance of ENMG alterations (OR, 2.94; p=0.0031). The SPHHC group presented a 4.04-fold higher chance of neural impairment (OR, 4.04; p=0.020). The peripheral blood qPCR positivity gives a 2.08-fold higher chance (OR, 2.08; p=0.028); and the presence of at least one BCG vaccine scar demonstrated 2.44-fold greater protection against neural impairment (OR, 0.41; p=0.044). Conclusion: In Study 1, the utilization of serological, molecular and neurophysiological tools in patients with suspicion of PNL contributed not only to early diagnosis, but also to a correct clinical classification and adequate treatment, thus preventing sequelae. Therefore, we propose a new recommendation for diagnosing PNL through the implementation of more specific and sensitive methods, aiming to make this condition less underdiagnosed. In Study 2, annual monitoring of domiciliary contacts through clinical exam and serological evaluation (anti-PGLl ELISA), for at least 5-7 years, demonstrated that seropositivity confers a greater chance of peripheral neural impairment evaluated by electroneuromyography and development of multibacillary forms. The combined use of three assays (ELISA anti-PGL1, peripheral blood qPCR and BCG scar) can identify individuals at high risk for developing leprosy neuropathy, not only indicating the early initiation of treatment in those whose diagnosis is confirmed by M. leprae DNA detection in qPCR of intradermic smear and/or altered ENMG, but also justifying chemoprophylaxis in those that do not yet present clinical or neurophysiological evidence of neural impairment.
Keywords: Ciências Médicas
Hanseníase
Hanseníase - Diagnóstico
Hanseníase - Prevenção
Hanseníase neural primária
Eletroneuromiografia
Neuropatia periférica
Contatos domiciliares
ELISA anti-PGL1
Leprosy
Primay neural leprosy
Electroneuromyography
Peripheral neuropathy
Household contacts
Area (s) of CNPq: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA
Language: por
Country: Brasil
Publisher: Universidade Federal de Uberlândia
Program: Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde
Quote: SANTOS. Diogo Fernandes dos. Aspectos clínicos, moleculares, sorológicos e neurofisiológicos no diagnóstico precoce da neuropatia hansênica. 2017. 178 p. Tese (Doutorado em Ciências da Saúde) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2017.
Document identifier: x
URI: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/19892
Date of defense: 28-Aug-2017
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