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Document type: Tese
Access type: Acesso Aberto
Title: Diagnóstico e caracterização molecular de Cryptosporidium spp., Giardia spp. e Enterocytozoon bieneusi em aves das microrregiões de Uberlândia e Belo Horizonte, MG, Brasil
Author: Cunha, Maria Júlia Rodrigues da
First Advisor: Cury, Márcia Cristina
First member of the Committee: Soares, Rodrigo Martins
Second member of the Committee: Moraes, Fernanda Rosalinsk
Third member of the Committee: Fiuza, Vagner Ricardo da Silva
Fourth member of the Committee: Goulart Filho, Luiz Ricardo
Summary: Infecções parasitárias estão entre os problemas sanitários comuns que acometem aves em todo mundo. A identificação de Cryptosporidium spp., Giardia spp. e Enterocytozoon bieneusi em aves é relevante, visto que esses animais podem agir como veiculadores dos parasitos para o ser humano, pela contaminação ambiental. O objetivo deste estudo foi determinar a positividade e caracterizar molecularmente as espécies/genótipos de Cryptosporidium spp., Giardia spp. e E. bieneusi em aves de diferentes locais das microrregiões de Uberlândia e Belo Horizonte, MG, Brasil. O DNA, extraído diretamente das fezes, foi submetido a reações de nested-PCR para amplificação de fragmentos dos genes SSU rRNA, SSU rRNA e ITS de Cryptosporidium spp., Giardia spp. e E. bieneusi, respectivamente. Das 255 amostras coletadas, 25 (9,8%) foram positivas para Cryptosporidium spp., duas (0,78%) para Giardia spp. e 27 (10,6%) para E. bieneusi. Não foi encontrada diferença estatisticamente significante na positividade dos parasitos estudados entre as aves das microrregiões de Uberlândia e Belo Horizonte. Análises de RFLP-PCR e sequenciamento identificaram C. meleagridis em três galinhas (Gallus gallus domesticus), um peru (Meleagris gallopavo) e uma codorna (Coturnix coturnix) de Uberlândia e em 11 galinhas de Belo Horizonte. C. baileyi foi observado em três galinhas e um ganso africano (Anser Cygnoides) de Uberlândia e em uma galinha e uma codorna de Belo Horizonte. Genótipo de pato foi identificado em um marreco-mandarim (Aix galericulata) de Uberlândia e infecção mista (C. meleagridis/C.baileyi) foi reportado em uma galinha de Uberlândia. A subtipagem de C. meleagridis revelou a presença de três famílias. A família IIIg foi identificada em nove isolados e compreendeu 4 subtipos, sendo dois subtipos novos e dois, anteriormente, reportados. A família IIIb foi observada em dois isolados, abrangendo dois subtipos diferentes, já relatados na literatura. A família IIIa foi encontrada em um isolado, cujo subtipo foi considerado inédito. As amostras sequenciadas para Giardia spp., de uma galinha e de um tucano (Ramphastos toco), ambos provenientes de Uberlândia, foram classificadas como Giardia duodenalis assemblage A. Para E. bieneusi, o sequenciamento identificou genótipo D em oito galinhas, uma codorna e um ganso-africano de Uberlândia e em cinco galinhas de Belo Horizonte. A amostra de uma galinha d’Angola (Numida meleagris) proveniente de Uberlândia apresentou o genótipo Tipo IV. O genótipo Peru6 foi observado em um faisão (Phasianus colchicus) e em dois Pombos-domésticos (Columba livia) de Belo Horizonte. O genótipo Peru11 foi identificado em quatro galinhas de Uberlândia e em quatro galinhas de Belo Horizonte. A presença de espécies/genótipos de Cryptosporidium spp., Giardia spp. e E. bieneusi, considerados zoonóticos, em animais desse estudo, pode gerar impacto negativo na saúde pública.
Abstract: Parasitic infection is among the most common health problems that affect birds worldwide. The identification of Cryptosporidium spp., Giardia spp. and Enterocytozoon bieneusi in birds is relevant because these animals can act as disseminators of these parasites to humans through environmental contamination. The aim of this research was to determine the prevalence and perform molecular characterization of Cryptosporidium spp., Giardia spp. and E. bieneusi species/genotypes in feces from several microregions of Uberlândia and Belo Horizonte, MG, Brazil. The DNA extracted directly from feces was submitted to nested-PCR analysis for amplification of fragments of the SSU rDNA of Cryptosporidium spp.and Giardia spp. and of the ITS gene of E. bieneusi. Out of 255 samples collected, 25 (9.8%) were positive for Cryptosporidium spp., two (0.78%) for Giardia spp. and 27 (10.6%) for E. bieneusi. There was no significant difference in the prevalence of parasites studied among birds from the microregions of Uberlândia and Belo Horizonte. RFLP-PCR and sequencing analysis have identified C. meleagridis in three chickens (Gallus gallus domesticus), one turkey (Meleagris gallopavo) and one quail (Coturnix coturnix) from Uberlândia and in 11 chickens from Belo Horizonte. C. baileyi was observed in three chickens and one swan goose (Anser Cygnoides) from Uberlândia and in one chicken and one quail from Belo Horizonte. The duck genotype was identified in one Mandarim duck (Aix galericulata and mixed infection (C. meleagridis/C.baileyi) was reported in one chicken from Uberlândia. C. meleagridis subtyping revealed the presence of three subtype families. The subtype Family IIIg was identified in nine isolates and comprised four distinct subtypes, two novel and two previously reported. The subtype family IIIb was observed in two isolates comprising two different subtypes that have been previously reported. The subtype Family IIIa was found in one isolate that represented a novel subtype. The sequenced samples for Giardia spp. from one chicken and one toucan (Ramphastos toco), both from Uberlândia, were classified as Giardia duodenalis assemblage A. For E. bieneusi, sequencing identified genotype D in eight chickens, one quail and one swan goose from Uberlândia and in five chickens from Belo Horizonte. The helmeted guineafowl (Numida meleagris) sample from Uberlândia presented the TypeIV genotype. Peru6 was observed in one pheasant (Phasianus colchicus) and in two pigeons (Columba livia) from Belo Horizonte. The Peru 11 genotype was identified in four chickens from Uberlândia and in four chickens from Belo Horizonte. The existence of zoonotic species/genotypes of Cryptosporidium spp., Giardia spp. and E. bieneusi in the animals of this study may have a negative impact on public health.
Keywords: Imunologia
Cryptosporidium
Giardia
Area (s) of CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA
Language: por
Country: Brasil
Publisher: Universidade Federal de Uberlândia
Program: Programa de Pós-graduação em Imunologia e Parasitologia Aplicadas
Quote: CUNHA, Maria Júlia Rodrigues da. Diagnóstico e caracterização molecular de Cryptosporidium spp., Giardia spp. e Enterocytozoon bieneusi em aves das microrregiões de Uberlândia e Belo Horizonte, MG, brasil. 2017. 97 f. Tese (Doutorado em Imunologia e Parasitologia Aplicadas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2017. DOI http://dx.doi.org/10.14393/ufu.te.2017.70.
Document identifier: http://dx.doi.org/10.14393/ufu.te.2017.70
URI: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/18267
Date of defense: 13-Mar-2017
Appears in Collections:TESE - Imunologia e Parasitologia Aplicadas

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