Use este identificador para citar ou linkar para este item: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/16675
Tipo do documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso Aberto
Título: Heme oxigenase-1 na infecção por Toxoplasma gondii: funções divergentes no controle do parasitismo in vitro e in vivo
Autor(es): Araujo, Ester Cristina Borges
Primeiro orientador: Silva, Neide Maria da
Primeiro membro da banca: Rodrigues, Denise Bertolucci Rocha
Segundo membro da banca: Silva, Marcelo José Barbosa
Resumo: Toxoplasma gondii é um parasito intracelular obrigatório que induz uma resposta imune do tipo Th1 em seus hospedeiros. O parasito tem uma ampla distribuição mundial, sendo que as formas mais graves da doença ocorrem principalmente em indivíduos imunocomprometidos. A heme oxigenase-1 (HO-1) é a enzima responsável pelo catabolismo da heme livre, um composto capaz de induzir uma intensa resposta inflamatória. Além disso, a expressão de HO- 1 é induzida diante de vários estímulos, desencadeando uma resposta anti-inflamatória em situações de estresse biológico. Com o objetivo de investigar o papel da HO-1 na infecção por T. gondii, macrófagos RAW 264.7 foram infectados com parasitos da cepa RH e tratados com protoporfirina de zinco IX (ZnPPIX) ou hemina, os quais inibem ou induzem a atividade de HO-1, respectivamente. Para verificação do papel da HO-1 na infecção in vivo, camundongos BALB/c e C57BL/6 foram infectados com a cepa ME49 de T. gondii e tratados com ZnPPIX ou hemina. Os resultados mostraram que a inibição de HO-1 diminuiu o parasitismo nos macrófagos RAW 264.7, sendo que esse mecanismo parece ser independente de óxido nítrico (NO), uma vez que o tratamento com ZnPPIX não alterou os níveis de produção de NO. Além disso, macrófagos infectados, estimulados com IFN-g e tratados com hemina mostraram um aumento na produção de NO. No entanto, essas células quando infectadas e tratadas apenas com hemina apresentaram uma maior replicação do parasito. Durante a infecção in vivo, observou-se que a atividade de HO-1 não ocasionou alterações expressivas na patologia dos órgãos periféricos de camundongos BALB/c e C57BL/6 infectados com T. gondii. Apesar disso, camundongos de ambas as linhagens tratados com ZnPPIX apresentaram maior parasitismo tecidual no pulmão, enquanto que o tratamento com hemina diminuiu a replicação do parasito no intestino e pulmão de camundongos C57BL/6. A mensuração de citocinas (IFN-g, TNF, TGF-b e IL-10) no soro dos animais infectados e tratados com hemina ou ZnPPIX mostrou que a indução ou inibição de HO-1 não altera significativamente os níveis sorológicos de citocinas nos animais BALB/c e C57BL/6 infectados com T. gondii.. Em conclusão, nossos dados sugerem que o aumento da atividade de HO-1 é importante para diminuir a replicação de T. gondii no pulmão e no intestino delgado, embora seja necessária a elucidação dos mecanismos envolvidos. Além disso, os mecanismos mediados pela HO-1 durante a infecção por T. gondii são diferentes in vitro e in vivo, uma vez que o aumento da atividade de HO-1 potencializa a multiplicação do parasito in vitro.
Abstract: Toxoplasma gondii is an apicomplexan parasite characterized to induce type 1 immune response in infected hosts. The parasite has a worldwide distribution and the more severe forms of the disease occur mainly in immunocompromised individuals. Heme oxygenase-1 (HO-1) is the enzyme that catabolizes free heme that induces an intense inflammatory response. Furthermore, the expression of HO-1 is induced by different stimuli, triggering an anti-inflammatory response during biological stress. In order to investigate the role of HO-1 during T. gondii infection, RAW 264.7 macrophages were infected with RH strain of T. gondii and treated with zinc protoporphyrin IX (ZnPPIX) or hemin, which inhibit or induce HO-1 expression, respectively. To verify the role of HO-1 during in vivo infection, BALB/c and C57BL/6 mice were infected with ME49 strain of T. gondii and treated with hemin or ZnPPIX during 12 days. The results showed that the inhibition of HO-1 decreased the parasitism in murine RAW 264.7 macrophages and this mechanism seems to be independent of nitric oxide (NO), since ZnPPIX treatment did not alter NO production. In addition, infected RAW 264.7 macrophages stimulated with IFN-g and treated with hemin presented an increase in NO production; on the other hand, RAW 264.7 cells treated with hemin presented higher parasite replication in comparison with non-treated ones. During in vivo infection, we observed that the activity of HO-1 did not alter the inflammatory changes in the organs of T. gondii infected BALB/c and C57BL/6 mice. Interestingly, both mice lineages treated with ZnPPIX showed higher parasitism in the lung, whereas treatment with hemin decreased the replication of the parasite in the lung and small intestine of C57BL/6. The levels of IFN-g, TNF, TGF-b and IL-10 in the sera of infected animals were not altered with the inhibition or induction of HO-1 activity. In conclusion, our data suggest that the increased HO-1 activity is important to decrease T. gondii replication in the lung and small intestine, although the mechanisms involved need to be elucidated. Additionally, the mechanisms mediated by HO-1 in T. gondii infection are different in vitro and in vivo, since the increased HO-1 activity enhances the parasite multiplication in vitro.
Palavras-chave: Camundongos BALB/c e C57BL/6
Citocinas
Heme oxigenase-1
Hemina
Óxido nítrico
Toxoplasma gondii
ZnPPIX
BALB/c and C57BL/6 mice
Cytokines
Nitric oxide
Hemin
Toxoplasmose
Área(s) do CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA::IMUNOLOGIA APLICADA
Idioma: por
País: BR
Editora: Universidade Federal de Uberlândia
Sigla da instituição: UFU
Departamento: Ciências Biológicas
Programa: Programa de Pós-graduação em Imunologia e Parasitologia Aplicadas
Referência: ARAUJO, Ester Cristina Borges. Heme oxigenase-1 na infecção por Toxoplasma gondii: funções divergentes no controle do parasitismo in vitro e in vivo. 2011. 74 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011.
URI: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/16675
Data de defesa: 28-Fev-2011
Aparece nas coleções:DISSERTAÇÃO - Imunologia e Parasitologia Aplicadas

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