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https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15696| Tipo do documento: | Tese |
| Tipo de acesso: | Acesso Aberto |
| Título: | Construção de uma biblioteca de fragmentos de anticorpos monoclonais apresentados em fagos e seleção de clone neutralizante de toxinas presentes na peçonha de Bothrops pauloensis |
| Autor(es): | Cardoso, Rone |
| Primeiro orientador: | Goulart Filho, Luiz Ricardo |
| Primeiro membro da banca: | Ávila, Veridiana de Melo Rodrigues |
| Segundo membro da banca: | Vieira, Carlos Ueira |
| Terceiro membro da banca: | Soares, Andreimar Martins |
| Quarto membro da banca: | Araujo, Heloisa Sobreiro Selistre de |
| Resumo: | Metaloproteinases são enzimas hidrolíticas do tipo endopeptidases que dependem da ligação de um metal, geralmente, o zinco, em seu sítio catalítico para manifestação de suas atividades. Estas enzimas são os principais componentes de peçonhas botrópicas responsáveis por seus efeitos hemorrágicos. Neste estudo foi construída uma biblioteca de fragmentos de anticorpos recombinantes, derivados de galinhas imunizadas com peçonha bruta de Bothrops pauloensis. A biblioteca foi utilizada para selecionar fagos expressando scFvs ligantes a toxinas presentes na peçonha, e para expressão, puricação e identificação de anticorpos capazes de inibir diversas atividades tóxicas causadas pela peçonhas de B. pauloensis. Por meio de ensaios biológicos e enzimáticos, constatou-se a capacidade da molécula scFv (C5) em inibir as ações hemorrágica e fibrinogenolítica da peçonha bruta e de uma metaloprotease isolada (Neuwiedase) da mesma peçonha. |
| Abstract: | Metalloproteinases are hydrolytic endopeptidase-like enzymes that depend on the ligation of a metal íon, such as zinc, in the catalytic site for its activity. These enzymes are the main components of bothropic venoms that are responsible for the typical hemorrhagic effect. In this study, we have constructed a combinatorial library of scFv monoclonal antibodies derived from immunized chickens with crude venom of Bothrops pauloensis. The scFv library was screened for ligands to the toxins of the crude venom in order to identify antibodies that were able to inhibit the toxic activities caused by B. pauloensis venoms. Biological and enzymatic assays demonstrated that one scFv clone was able to inhibit the hemorrhagic and fibrinogenolytic activities of the crude venom and of an isolated metaloprotease (Neuwiedase). |
| Palavras-chave: | ScFv Metaloprotease Peçonha botrópica Hemorragia Phage display Metalloprotease Bothropic venom Hemorrhagyc Genética molecular Cobra venenosa - Veneno Anticorpos monoclonais |
| Área(s) do CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA |
| Idioma: | por |
| País: | BR |
| Editora: | Universidade Federal de Uberlândia |
| Sigla da instituição: | UFU |
| Departamento: | Ciências Biológicas |
| Programa: | Programa de Pós-graduação em Genética e Bioquímica |
| Referência: | CARDOSO, Rone. Construção de uma biblioteca de fragmentos de anticorpos monoclonais apresentados em fagos e seleção de clone neutralizante de toxinas presentes na peçonha de Bothrops pauloensis. 2008. 131 f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2008. |
| URI: | https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15696 |
| Data de defesa: | 31-Jul-2008 |
| Aparece nas coleções: | TESE - Genética e Bioquímica |
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| Arquivo | Descrição | Tamanho | Formato | |
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