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metadata.dc.type: Tese
metadata.dc.rights: Acesso Aberto
Title: Construção de uma biblioteca de fragmentos de anticorpos monoclonais apresentados em fagos e seleção de clone neutralizante de toxinas presentes na peçonha de Bothrops pauloensis
metadata.dc.creator: Cardoso, Rone
metadata.dc.contributor.advisor1: Goulart Filho, Luiz Ricardo
metadata.dc.contributor.referee1: Ávila, Veridiana de Melo Rodrigues
metadata.dc.contributor.referee2: Vieira, Carlos Ueira
metadata.dc.contributor.referee3: Soares, Andreimar Martins
metadata.dc.contributor.referee4: Araujo, Heloisa Sobreiro Selistre de
metadata.dc.description.resumo: Metaloproteinases são enzimas hidrolíticas do tipo endopeptidases que dependem da ligação de um metal, geralmente, o zinco, em seu sítio catalítico para manifestação de suas atividades. Estas enzimas são os principais componentes de peçonhas botrópicas responsáveis por seus efeitos hemorrágicos. Neste estudo foi construída uma biblioteca de fragmentos de anticorpos recombinantes, derivados de galinhas imunizadas com peçonha bruta de Bothrops pauloensis. A biblioteca foi utilizada para selecionar fagos expressando scFvs ligantes a toxinas presentes na peçonha, e para expressão, puricação e identificação de anticorpos capazes de inibir diversas atividades tóxicas causadas pela peçonhas de B. pauloensis. Por meio de ensaios biológicos e enzimáticos, constatou-se a capacidade da molécula scFv (C5) em inibir as ações hemorrágica e fibrinogenolítica da peçonha bruta e de uma metaloprotease isolada (Neuwiedase) da mesma peçonha.
Abstract: Metalloproteinases are hydrolytic endopeptidase-like enzymes that depend on the ligation of a metal íon, such as zinc, in the catalytic site for its activity. These enzymes are the main components of bothropic venoms that are responsible for the typical hemorrhagic effect. In this study, we have constructed a combinatorial library of scFv monoclonal antibodies derived from immunized chickens with crude venom of Bothrops pauloensis. The scFv library was screened for ligands to the toxins of the crude venom in order to identify antibodies that were able to inhibit the toxic activities caused by B. pauloensis venoms. Biological and enzymatic assays demonstrated that one scFv clone was able to inhibit the hemorrhagic and fibrinogenolytic activities of the crude venom and of an isolated metaloprotease (Neuwiedase).
Keywords: ScFv
Metaloprotease
Peçonha botrópica
Hemorragia
Phage display
Metalloprotease
Bothropic venom
Hemorrhagyc
Genética molecular
Cobra venenosa - Veneno
Anticorpos monoclonais
metadata.dc.subject.cnpq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA
metadata.dc.language: por
metadata.dc.publisher.country: BR
Publisher: Universidade Federal de Uberlândia
metadata.dc.publisher.initials: UFU
metadata.dc.publisher.department: Ciências Biológicas
metadata.dc.publisher.program: Programa de Pós-graduação em Genética e Bioquímica
Citation: CARDOSO, Rone. Construção de uma biblioteca de fragmentos de anticorpos monoclonais apresentados em fagos e seleção de clone neutralizante de toxinas presentes na peçonha de Bothrops pauloensis. 2008. 131 f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2008.
URI: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15696
Issue Date: 31-Jul-2008
Appears in Collections:TESE - Genética e Bioquímica

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