Please use this identifier to cite or link to this item:
https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15696| Document type: | Tese |
| Access type: | Acesso Aberto |
| Title: | Construção de uma biblioteca de fragmentos de anticorpos monoclonais apresentados em fagos e seleção de clone neutralizante de toxinas presentes na peçonha de Bothrops pauloensis |
| Author: | Cardoso, Rone |
| First Advisor: | Goulart Filho, Luiz Ricardo |
| First member of the Committee: | Ávila, Veridiana de Melo Rodrigues |
| Second member of the Committee: | Vieira, Carlos Ueira |
| Third member of the Committee: | Soares, Andreimar Martins |
| Fourth member of the Committee: | Araujo, Heloisa Sobreiro Selistre de |
| Summary: | Metaloproteinases são enzimas hidrolíticas do tipo endopeptidases que dependem da ligação de um metal, geralmente, o zinco, em seu sítio catalítico para manifestação de suas atividades. Estas enzimas são os principais componentes de peçonhas botrópicas responsáveis por seus efeitos hemorrágicos. Neste estudo foi construída uma biblioteca de fragmentos de anticorpos recombinantes, derivados de galinhas imunizadas com peçonha bruta de Bothrops pauloensis. A biblioteca foi utilizada para selecionar fagos expressando scFvs ligantes a toxinas presentes na peçonha, e para expressão, puricação e identificação de anticorpos capazes de inibir diversas atividades tóxicas causadas pela peçonhas de B. pauloensis. Por meio de ensaios biológicos e enzimáticos, constatou-se a capacidade da molécula scFv (C5) em inibir as ações hemorrágica e fibrinogenolítica da peçonha bruta e de uma metaloprotease isolada (Neuwiedase) da mesma peçonha. |
| Abstract: | Metalloproteinases are hydrolytic endopeptidase-like enzymes that depend on the ligation of a metal íon, such as zinc, in the catalytic site for its activity. These enzymes are the main components of bothropic venoms that are responsible for the typical hemorrhagic effect. In this study, we have constructed a combinatorial library of scFv monoclonal antibodies derived from immunized chickens with crude venom of Bothrops pauloensis. The scFv library was screened for ligands to the toxins of the crude venom in order to identify antibodies that were able to inhibit the toxic activities caused by B. pauloensis venoms. Biological and enzymatic assays demonstrated that one scFv clone was able to inhibit the hemorrhagic and fibrinogenolytic activities of the crude venom and of an isolated metaloprotease (Neuwiedase). |
| Keywords: | ScFv Metaloprotease Peçonha botrópica Hemorragia Phage display Metalloprotease Bothropic venom Hemorrhagyc Genética molecular Cobra venenosa - Veneno Anticorpos monoclonais |
| Area (s) of CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA |
| Language: | por |
| Country: | BR |
| Publisher: | Universidade Federal de Uberlândia |
| Institution Acronym: | UFU |
| Department: | Ciências Biológicas |
| Program: | Programa de Pós-graduação em Genética e Bioquímica |
| Quote: | CARDOSO, Rone. Construção de uma biblioteca de fragmentos de anticorpos monoclonais apresentados em fagos e seleção de clone neutralizante de toxinas presentes na peçonha de Bothrops pauloensis. 2008. 131 f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2008. |
| URI: | https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15696 |
| Date of defense: | 31-Jul-2008 |
| Appears in Collections: | TESE - Genética e Bioquímica |
Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.