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https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15869
Tipo do documento: | Dissertação |
Tipo de acesso: | Acesso Aberto |
Título: | Mapeamento de epitopos funcionais do receptor CD14 por Phage Display e o reconhecimento de componentes bacterianos |
Autor(es): | Alves, Patrícia Terra |
Primeiro orientador: | Goulart Filho, Luiz Ricardo |
Primeiro membro da banca: | Mineo, Tiago Wilson Patriarca |
Segundo membro da banca: | Vieira, Gustavo Fioravanti |
Resumo: | O antígeno de diferenciação 14 é uma molécula chave da imunidade inata. É um receptor de reconhecimento padrão que reconhece principalmente lipopolissacarídeo (LPS), ácido lipoteicóico e ácido araquidônico, após este reconhecimento a indução da liberação de diversas citocinas como um mecanismo de defesa do sistema imunológico. Diversos estudos sugerem diferentes epítopos da região N-Terminal da molécula como sítios de reconhecimento ao LPS, no entanto, resultados contraditórios sobre a sequência de reconhecimento ainda persistem. Neste trabalho, epítopos funcionais da molécula CD14 foram mapeadas através da técnica de Phage Display utilizando anticorpos anti-CD14 comerciais e uma biblioteca de peptídeos Ph.D-C7C expressa na superfície de fagos filamentosos M13. Análises in silico e funcionais foram realizadas para mapear os peptídeos selecionados na estrutura 3D do CD14 e verificar a imunoreatividade dos peptídeos contra componentes bacterianos (bactéria gram-positivas e gram-negativas). Os peptídeos selecionados reagiram fortemente contra diferentes bactérias, além do o reconhecimento da região amino terminal do CD14, foi demonstrado uma segunda região no meio do receptor com a capacidade de ligação a componentes bacterianos. Adicional análise in silico sugeriram um possível papel dos epítopos do CD14 como peptídeos antimicrobianos naturais. |
Abstract: | The cluster of differentiation antigen 14 (CD14) is a key molecule of the innate immunity. This pattern recognition receptor binds mainly to lipopolysaccharide (LPS), lipotechoic acid, arachidonic acid and thus induces the releases various cytokines as a defense mechanism. Several studies suggest that different regions of the amino-terminal portion of the molecule may be involved in the LPS binding; however, controversial results on the recognition sequence still persist. In this work, functional epitopes of the CD14 molecule were mapped through Phage Display by using a 7-mer conformational constrained random peptide library against a monoclonal antibody anti-soluble CD14-fraction ST and a polyclonal anti-CD14. In silico and empirical analyzes were performed to map the selected peptides into the CD14 3D structure. Immunoreactivity tests of peptides against bacterial components of Gram+ and Gram- bacteria were performed in order to demonstrate their functional recognition. All peptides strongly reacted against all bacteria, and besides the recongtion of the amino-terminal region, we were able to demonstrate a second epitope site in the middle of the receptor. Additional in silico analysis suggests a possible role of CD14 epitopes as natural antimicrobial peptides. |
Palavras-chave: | CD14 Mapeamento de epítopos Receptor de LPS Phage display Epitope mapping LPS receptor Epítopos |
Área(s) do CNPq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA |
Idioma: | por |
País: | BR |
Editora: | Universidade Federal de Uberlândia |
Sigla da instituição: | UFU |
Departamento: | Ciências Biológicas |
Programa: | Programa de Pós-graduação em Genética e Bioquímica |
Referência: | ALVES, Patrícia Terra. Mapeamento de epitopos funcionais do receptor CD14 por Phage Display e o reconhecimento de componentes bacterianos. 2013. 68 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2013. |
URI: | https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15869 |
Data de defesa: | 29-Jul-2013 |
Aparece nas coleções: | DISSERTAÇÃO - Genética e Bioquímica |
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Arquivo | Descrição | Tamanho | Formato | |
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