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Document type: Dissertação
Access type: Acesso Aberto
Title: Produção de alérgenos recombinantes relacionados a Der p 1 de Dermatophagoides pteronyssinus com potencial aplicação na avaliação da resposta imune humoral e celular em pacientes com alergias respiratórias
Author: Tomaz, Laura Fontes
First Advisor: Taketomi, Ernesto Akio
First coorientator: Napolitano, Danielle Reis
Summary: Dermatophagoides pteronyssinus (Dp) é uma importante espécie de ácaro da poeira domiciliar e está associado com doenças alérgicas. Alérgenos de Dp são causas importantes de sensibilização e resposta mediada por imunoglobulina E (IgE) entre pacientes com asma e rinite alérgica. O objetivo deste estudo foi produzir as proteínas recombinantes Der p 1 e os epítopos ligantes de IgE relacionados com a proteína Der p 1 (fragmento com os aminoácidos 172-243 (rDer p 1172-243)) para avaliar sua reatividade a IgE no soro de indivíduos sensibilizados ao ácaro usando ensaio imunoenzimático. A sequência de Der p 1 total e Der p 1172-243 foram amplificados e subclonados em E. coli. Após a expressão e a purificação, a reatividade de IgE para rDer p 1 e rDer p 1172-243 foi determinada por ELISA. Os resultados demonstraram que a proteína rDer p 1 expressa em E. coli apresentou um peso molecular estimado de 26 kDa e rDer p 1172-243 aproximadamente 8kDa. A proteína Der p 1 expressa e rDer p 1172-243 reagiu positivamente a IgE em 88% e 84% nos soros de pacientes alérgicos, respectivamente. Entretanto, soros de pacientes negativos demonstrou reatividade cruzada para rDer p 1, conquanto o mesmo não foi observado com rDer p 1172-243. Pode-se sugerir que rDer p 1 172-243 são candidatos promissores para o diagnóstico de alergia causada por D. pteronyssinus em pacientes sensibilizados a este ácaro.
Abstract: Dermatophagoides pteronyssinus (Dp) is an important specie of house dust mite associated with allergic diseases. Allergens from Dp are important causes of sensitization and mediated responses to specific immunoglobulin E (IgE) among patients with asthma and allergic rhinitis. The aim of this study was to produce recombinant protein Der p 1 and Der p 1-related IgE binding epitopes (rDer p 1172-243) to evaluate their reactivity to IgE in the serum of mite sensitized individuals using enzyme immunoassays. The sequences of rDer p 1 and rDer p 1172-243 were amplified and subcloned into E. coli. After expression and purification the reactivity of IgE to rDer p 1 and rDer p1172-243 was determined by ELISA. The results showed that rDer p 1 expressed in E. coli presented an estimated molecular weight of about 26 kDa and rDer p 1172-243 about 8kDa. The expressed rDer p 1 protein and rDer p 1172-243 reacted positively with IgE in 88% and 84% of sera from allergic patients, respectively. However, sera from negative patients showed crossreactivity to rDer p 1, although the same was not observed for rDer p 1172-243. It can be suggested that rDer p 1172-243 are promising candidates for the diagnosis of allergy caused by D. pteronyssinus in mite sensitized patients.
Keywords: Alergia
Dermatophagoides pteronyssinus
Alérgenos recombinantes
Allergy
Recombinant allergens
Imunologia
Area (s) of CNPq: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE
Language: por
Country: BR
Publisher: Universidade Federal de Uberlândia
Institution Acronym: UFU
Department: Ciências da Saúde
Program: Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde
Quote: TOMAZ, Laura Fontes. Produção de alérgenos recombinantes relacionados a Der p 1 de Dermatophagoides pteronyssinus com potencial aplicação na avaliação da resposta imune humoral e celular em pacientes com alergias respiratórias. 2011. 81 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011.
URI: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/12714
Date of defense: 26-Aug-2011
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