Publicação: Nanocontrole da transferência horizontal de gene de resistência a antibióticos em bactérias de importância em alimentos
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CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS
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Takeuchi, Micaela Guidotti
Resumo
A utilização descontrolada de antibióticos vêm desencadeando o aparecimento cada vez maior
de bactérias super-resistentes, sendo, portanto, uma das maiores preocupações mundiais. Além
disso, atualmente, existe baixa produção de novos antimicrobianos proporcionalmente ao
elevado surgimento dessas superbactérias. Como os antibióticos também são utilizados na
produção animal, o aparecimento de superbactérias em produtos de origem animal (POA), vêm
sendo recorrentes e de difícil eliminação na cadeia produtiva, podendo, portanto, causar
doenças transmitidas por alimentos de difícil tratamento. Uma alternativa que vem mostrando
resultados promissores, é a utilização de óleos essenciais combinados com nanotecnologia a
fim de mitigar a transferência desses genes resistentes a outras bactérias no ambiente industrial
de aves, por exemplo. Portanto, o objetivo principal deste trabalho foi avaliar o efeito de
carreador lipídico nanoestruturado de óleo essencial de sálvia no controle do processo de
conjugação bacteriana entre cepas selvagens de Salmonella Heidelberg (SH01) doadora dos
genes blaTEM na sua forma planctônica e Escherichia coli J53 AzR (azida sódica resistente),
como receptora. A avaliação foi feita por meio da determinação da frequência de
transconjugantes de E. coli via análise fenotípica e genotípica, mediante teste de resistência
antimicrobiana e PCR convencional, respectivamente. Foi feita padronização de três técnicas
diferentes de conjugação e escolhida a metodologia 1, meio líquido com três horas de
incubação, como a melhor de acordo com a maior frequência de conjugação e pela significância
na contagem de transconjugantes, principalmente com chicken juice (CJ) (p=0,0013). Na
testagem do nanocarreador, os valores da FCR foram reduzidos de 2,2% para 0,028% no teste
tradicional e de 6,2 para 0,098% na conjugação utilizando CJ correspondentes a uma redução
de transconjugantes de 79,6 vezes sem CJ e 67,6 vezes com CJ. Além disso, todas as colônias
de transconjugantes escolhidas aleatoriamente apresentaram o gene blaTEM identificado
genotipicamente, confirmando a efetividade do processo. Dessa forma, o nanocomposto
demonstrou efeito promissor como redutor/inibidor da conjugação bacteriana aplicável à
indústria de aves.
Abstract
The uncontrolled use of antibiotics has been triggering the increasing appearance of superresistant bacteria, being, therefore, one of the biggest concerns worldwide. In addition,
currently, there is low production of new antimicrobials in proportion to the high emergence
of these superbugs. As antibiotics are also used in animal production, the appearance of
superbugs in products of animal origin (POA) has been recurrent and difficult to eliminate in
the production chain, and may therefore cause foodborne illnesses (DTAs) that are difficult to
treat. An alternative that has been showing promising results is the use of essential oils
combined with nanotechnology in order to mitigate the transfer of these resistant genes to other
bacteria in the industrial environment of poultry, for example. Therefore, the main objective of
this work was to evaluate the effect of a nanostructured lipid carrier of sage essential oil on the
control of the bacterial conjugation process between wild strains of Salmonella Heidelberg
(SH01) which is a donor of blaTEM genes in its planktonic form and Escherichia coli J53 AzR
(resistant sodium azide) as a receptor. The evaluation was performed by determining the
frequency of E. coli transconjugants via phenotypic and genotypic analysis, using antimicrobial
resistance test and conventional PCR, respectively. Three different conjugation techniques
were standardized and methodology 1, liquid medium with three hours of incubation, was
chosen as the best one according to the highest frequency of conjugation and the significance
in the count of transconjugants, mainly with chicken juice (CJ) (p=0.0013). In testing the
nanocarrier, the FCR values were reduced from 2.2% to 0.028% in the traditional test and from
6.2 to 0.098% in the conjugation using CJ corresponding to a reduction of transconjugants of
79.6 times without CJ and 67, 6 times with CJ. Furthermore, all colonies of transconjugants
chosen at random presented the blaTEM gene genotypically identified, confirming the
effectiveness of the process. Thus, the nanocomposite demonstrated a promising effect as a
reducer/inhibitor of bacterial conjugation applicable to the poultry industry.
Palavras-chave
blaTEM, Nanostructured lipid carriers, Enterobacteriaceae, Enterobacteriaceae, Chicken juice, Resistência antimicrobiana, Carreadores lipídicos nanoestruturados, Antimicrobial resistance
Citação
BRUM, Bárbara de Araújo. Nanocontrole da transferência horizontal de gene de resistência a antibióticos em bactérias de importância em alimentos. 2022. 51 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Medicina Veterinária) – Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2023.
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