Publicação: Efeito na produção in vitro de embriões bovinos de diferentes concentrações de Beta-NGF no meio de maturação ovocitária
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CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA::REPRODUCAO ANIMAL
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Resumo
Uma das biotécnicas mais utilizadas nos últimos anos, aplicada à reprodução
animal, é a produção in vitro de embriões (PIVE), biotecnologia que tem desempenhado
papel de destaque na evolução da eficiência da bovinocultura. Isso se deve,
principalmente, à possibilidade de se aumentar a produção de bezerros por vaca
geneticamente superior. Porém, trata-se de uma técnica de alto custo e o aproveitamento
de ovócitos é pouco eficiente. Além disso, também foi verificada uma correlação positiva
entre a quantidade de Beta-NGF nos espermatozoides e as taxas de clivagem e
blastocisto na PIVE, o que indica possível atuação durante o desenvolvimento
embrionário inicial. Recentemente verificou-se que a adição de 100 ng/mL no meio de
maturação de ovócitos aumenta a eficiência da PIVE em bovinos. Com o presente
trabalho objetivou-se avaliar o efeito na produção in vitro de embriões bovinos de duas
diferentes concentrações de β-NGF no meio de maturação ovocitária. Para isso, foram
realizadas PIVEs, nas quais os ovócitos foram obtidos a partir da aspiração folicular, feita
em laboratório, de ovários coletados em abatedouro comercial de Araguari- MG. Foi
utilizado sêmen congelado de um único touro de central de processamento de sêmen
com fertilidade comprovada para produção in vitro de embriões. Em todas as rotinas
foram utilizadas gotas de meio de maturação sem suplementação proteica e com
suplementação de β-NGF nas concentrações de 100 ng/mL e 500 ng/mL. A taxa de
clivagem foi avaliada 48 horas após a fecundação in vitro, por meio da avaliação das
estruturas que apresentavam duas ou mais células. Sete dias após a fecundação, a taxa
de desenvolvimento embrionário era avaliada pela contagem de estruturas que iniciavam
a clivagem e alcançavam o estágio de blastocisto. A taxa de clivagem foi diferente entre
todos os tratamentos, sendo maior com 100 ng/mL e menor com 500 ng/mL. As taxas de
desenvolvimento embrionário não apresentaram diferença. Já a eficiência das PIVEs
também foi maior com 100 ng/mL e não apresentou diferença entre o controle e 500
ng/mL. Pôde-se concluir que a suplementação do meio de maturação de ovócitos com
100 ng/mL de NGF melhora a maturação ovocitária in vitro, melhorando a eficiência da
PIVE. Já a suplementação com 500 ng/mL provoca um efeito negativo, provavelmente
citotóxico, e consequentemente, não é indicada em rotinas de PIVE.
Abstract
One of the most used biotechniques in recent years, applied to animal
reproduction, is in vitro embryo production (IVP), a biotechnology that has played a
prominent role in the evolution of cattle breeding efficiency. This is mainly due to the
possibility of increasing the production of calves per genetically superior cow. However,
it is a high-cost technique and the use of oocytes is inefficient. In addition, a positive
correlation was also verified between the amount of Beta-NGF in sperm and cleavage
and blastocyst rates in PIVE, which indicates possible action during early embryonic
development. Recently, it was verified that the addition of 100 ng/mL in the oocyte
maturation medium increases the efficiency of PIVE in cattle. The present work aimed
to evaluate the effect on the in vitro production of bovine embryos of two different
concentrations of β-NGF in the oocyte maturation medium. For this, PIVEs were
performed, in which the oocytes were obtained from follicular aspiration, carried out in
the laboratory, from ovaries collected in a commercial slaughterhouse in Araguari-MG.
Frozen semen from a single bull from a semen processing center with proven fertility
was used for in vitro embryo production. In all routines, drops of maturation medium
were used without protein supplementation and with β-NGF supplementation at
concentrations of 100 ng/mL and 500 ng/mL. The cleavage rate was evaluated 48
hours after in vitro fertilization, by evaluating the structures that had two or more cells.
Seven days after fertilization, the rate of embryonic development was evaluated by
counting the structures that initiated cleavage and reached the blastocyst stage. The
cleavage rate was different between all treatments, being higher with 100 ng/mL and
lower with 500 ng/mL. Embryonic development rates showed no difference. The
efficiency of PIVEs was also higher with 100 ng/mL and do not show any difference
between the control and 500 ng/mL. It can be concluded that the supplementation of
the oocyte maturation medium with 100 ng/mL of NGF improves oocyte maturation in
vitro, improving the efficiency of PIVE. Supplementation with 500 ng/mL, on the other
hand, causes a negative effect, probably cytotoxic, and, consequently, is not indicated
in PIVE routines.
Palavras-chave
PIVE, IVEP, Beta-NGF, Embryo, Embrião, Oocyte, Ovócito, Spermatozoa, Espermatozoide
Citação
MARQUEZ, Heitor Pereira. Efeito na produção in vitro de embriões bovinos de diferentes concentrações de Beta-NGF no meio de maturação ovocitária. 2023. 28 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Medicina Veterinária) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2023.