Publicação: Efeitos do tratamento intradérmico com a jararagina-C, uma proteína tipo-disintegrina isolada da peçonha de Bothrops jararaca, sobre a cicatrização de feridas cutâneas em camundongos
Carregando...
Tipo do documento
Data
Direito de acesso
Coleções
Área do conhecimento
CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::QUIMICA DE MACROMOLECULAS
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Autores
Orientador
Coorientador
Clissa, Patrícia Bianca
Resumo
Neste trabalho foi avaliado o efeito da administração intradérmica da jararagina-C, uma
proteína tipo-disintegrina, isolada da peçonha de B. jararaca e com afinidade pela
integrina α2β1, durante a cicatrização de feridas excisionais. Quatro lesões foram
performadas na região dorsal de camundongos da linhagem Swiss, com o auxílio de um
punch de biópsia cirúrgico de 5 mm. Os animais foram distribuídos em dois grupos
experimentais, cujos indivíduos foram diariamente tratados com injeções de 10 µl de PBS
(grupo controle) ou da toxina (200 ng), aplicados nas bordas da ferida. Dez animais, de
cada um dos grupos experimentais, foram eutanasiados nos seguintes intervalos de tempo
1, 3, 7, 10 e 14 dias após a indução das lesões (totalizando 20 animais para cada intervalo).
Após a eutanásia, as feridas e a pele do seu entorno foram removidas com o auxílio de
um punch de biópsia de 8 mm, pesadas e processadas para análises bioquímicas,
histológicas e de biologia molecular. As feridas tratadas com a jararagina-C apresentaram
uma taxa de fechamento mais acelerada, acompanhada de uma rápida resolução da
resposta inflamatória, com redução do infiltrado de neutrófilos, dos níveis de citocinas
pró-inflamatórias (TNF-α, CXCL-1 e CCL2/JE/MCP-1) e um acúmulo de macrófagos
nos tecidos analisados. Observou-se também, nas lesões tratadas com esta proteína, uma
maior expressão de genes associados ao fenótipo de macrófagos alternativamente
ativados (M2), responsáveis pela resolução da resposta inflamatória e pela secreção de
vários mediadores associados com as etapas subsequentes do reparo.
Concomitantemente, a administração da toxina foi capaz de incitar a angiogênese nas
feridas, elevando o conteúdo de hemoglobina, a densidade de novos vasos sanguíneos e
a síntese de citocinas pró-angiogênicas (VEGF e FGF). Por fim, nas feridas dos grupos
tratados, observamos ainda um aumento da deposição de colágeno nas feridas,
acompanhado de níveis mais elevados da citocina pró-fibrogênica TGF-β1. Além disso,
ao avaliarmos a organização e a maturação da matriz, por meio da diferenciação entre
fibras de colágeno do tipo I e fibras de colágeno do tipo III, observamos que o tratamento
com a jararagina-C, resultou em uma deposição precoce e mais elevada de fibras de
colágeno do tipo I. Em conjunto, os dados sugerem que a administração da jararagina-C
acelerou o fechamento das feridas excisionais, por meio da modulação de respostas
importantes ao processo de cicatrização de feridas (ex.: inflamação, angiogênese e
fibrogênese). Desta forma, este trabalho não só contribui para a elucidação dos efeitos
ocasionados pela administração da jararagina-C, como também, para o aprofundamento
do conhecimento sobre a sinalização mediada pela integrina α2β1 nos processos avaliados,
permitindo o desenvolvimento de novas terapias para o tratamento de feridas cutâneas.
Abstract
In this work, the effect of intradermal administration of jararhagin-C, a disintegrin-type
protein, isolated from B. jararaca venom and with affinity for α2β1 integrin, was
evaluated during the healing of excisional wounds. Four lesions were performed on the
dorsal region of Swiss strain mice, with the aid of a 5 mm surgical biopsy punch. The
animals were divided into two experimental groups, whose subjects were daily treated
with injections of 10 µl of PBS (control group) or of the toxin (200 ng), applied to the
edges of the wound. Ten animals from each of the experimental groups, were euthanized
at the following time intervals 1, 3, 7, 10 and 14 days after lesion induction (totaling 20
animals for each interval). After euthanasia, the wounds and skin around them were
removed with the aid of an 8 mm biopsy punch, weighed and processed for biochemical,
histological and molecular biology analysis. Wounds treated with jararhagin-C showed a
faster rate of closure, accompanied by a rapid resolution of the inflammatory response,
with a reduction in neutrophil infiltrate, levels of pro-inflammatory cytokines (TNF-α,
CXCL-1 and CCL2 / JE / MCP-1) and an accumulation of macrophages in the analyzed
tissues. It was also observed, in the lesions treated with this protein, a greater expression
of genes associated with the phenotype of alternatively activated macrophages (M2),
responsible for the resolution of the inflammatory response and for the secretion of
several mediators associated with the subsequent stages of repair. Concomitantly, the
administration of the toxin was able to incite angiogenesis in the wounds, increasing the
hemoglobin content, the density of new blood vessels and the synthesis of pro-angiogenic
cytokines (VEGF and FGF). Finally, in the wounds of the treated groups, we also
observed an increase in the collagen deposition in the wounds, accompanied by higher
levels of the pro-fibrogenic cytokine TGF-β1. In addition, when evaluating the
organization and maturation of the matrix, by differentiating between type I collagen
fibers and type III collagen fibers, we observed that treatment with jararhagin-C resulted
in an early and higher deposition of type I collagen fibers. Considering everything, the
data suggest that the administration of jararhagin-C accelerated the closure of excisional
wounds by modulating important responses to the wound healing process (e.g.,
inflammation, angiogenesis and fibrogenesis). Thus, this work not only contributes to the
elucidation of the effects caused by the administration of jararhagin-C, but also to the
deepening of knowledge about the signaling mediated by the integrin α2β1 in the
evaluated processes, allowing the development of new therapies for the treatment of skin
wounds.
Palavras-chave
Cicatrização, Healing, Feridas cutâneas, Skin wounds, Disintegrinas, Disintegrins, Jararagina, Jararhagin, Integrinas, Integrins, Peçonha, Venom
Citação
FERREIRA, Bruno Antonio. Efeitos do tratamento intradérmico com a jararagina-C, uma proteína tipo-disintegrina isolada da peçonha de Bothrops jararaca, sobre a cicatrização de feridas cutâneas em camundongos. 2020. 89 f. Tese (Doutorado em Genética e Bioquímica) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2020. DOI http://dx.doi.org/10.14393/ufu.te.2021.5542.
Coleções
Avaliação
Revisão
Suplementado Por
Referenciado Por
Licença Creative Commons
Exceto quando indicado de outra forma, a licença deste item é descrita como Acesso Aberto