Publicação: Seleção de peptídeos reconhecidos por imunoglobulinas Y anti-metacestódeo
de Taenia solium por phage display
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA::IMUNOLOGIA APLICADA
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Resumo
Os metacestódeos de Taenia solium no homem instalam-se principalmente no sistema
nervoso central (SNC) causando neurocisticercose (NC), a parasitose mais freqüente do SNC.
A apresentação patológica da NC difere em relação à localização e viabilidade do cisticerco, e
mecanismos da resposta imunológica. Para estabelecer o diagnóstico de NC é necessária uma
interpretação correta dos sintomas clínicos, dos testes de neuroimagem e de
imunodiagnósticos, e dos dados epidemiológicos. A freqüente indisponibilidade de material
do parasito tem estimulado o desenvolvimento e uso de antígenos recombinantes nas análises
imunodiagnósticas, e desde a descrição da tecnologia de phage-display esta técnica tem
apresentado uma utilização cada vez mais crescente em diversas áreas das ciências, como a de
definir peptídeos para testes imunodiagnósticos. O objetivo deste estudo foi o isolamento de
mimetopos de metacestódeos de T. solium a partir da realização de biopanning utilizando IgY
anti-metacéstodeo de T. solium. A IgY, obtida através da imunização de galinhas com extrato
salino de metacéstodeos de T. solium, foi adsorvida em poços de microplacas para selecionar
peptídeos a partir de uma biblioteca de fagos em três rounds de biopanning. Os fagotopos
selecionados foram testados para o diagnóstico de NC através de ensaio de ELISA com 110
amostras de soro, sendo 40 de pacientes com NC e com outras doenças parasitárias, e 30
amostras de indivíduos saudáveis. Sete mimetopos apresentaram os melhores resultados no
diagnóstico da NC, e foram capazes de diferenciar a forma ativa da forma inativa de NC,
detectando aproximadamente 100% dos pacientes com a forma inativa. Nenhum dos clones
foi reativo com soros de pacientes com Echinococcus granulosus, e a especificidade variou de
85,7% a 94,3%. Esse trabalho foi o primeiro a utilizar a imunização de galináceos com extrato
salino de metacestódeos de T. solium. Os clones Cc6, Cc8, Cc25, Cc27, Cc30, Cc45 e Cc48,
apresentaram os melhores resultados, podendo ser considerados como potenciais marcadores
de fase inativa e uma ferramenta útil no prognóstico da doença, e também um reforço para os
testes de neuroimagem.
Abstract
The Taenia solium metacestodes localization in humans occours mainly in the central nervous
system (CNS) promoting the disease named neurocysticercosis (NC), the most frequent
parasitosis in the CNS. The pathological presentation of NC differs about localization and
viability of metacestodes, and host immunological response. For its diagnosis stabelishment is
necessary a right interpretation of clinical signs, neuroimagin and immunological tests, and
epidemiological data. The frequent inviability of parasite material has stimutaled the
development and usage of recombinant antigens in the immunodiagnosis, and since
describition of the phage-display tecnology this technique has presented increseier utilization
in several cientific areas, as selection of peptides that could be used for immunodiagnostic
test. The aim of this study was to obtain mimetopes of T. solium through biopanning using
IgY specific to T. solium metacestodes. The IgY obtained from immunizated chicken with T.
solium metacetodes saline extract was coated on microplate wells to select peptides from
phage library in a three rounds biopanning. The phagetopes selected were tested in NC
diagnosis by ELISA assay with 110 serum samples, 40 from NC patients and patients infected
with others parasitic diseases, and 30 samples of health individuals. Seven mimetopes shown
the best results in diagnostic patients with NC, and also they were capable to distinguish
active from inactive NC form, detecting almost even 100% of inactive NC patients. None of
the clones reacted with Echinococcus granulosus sera and the specificity ranged from 85.7%
to 94.3%. This study was the first utilizing chicken immunization using T. solium metacetodes
saline extract. The phage clones Cc6, Cc8, Cc25, Cc27, Cc30, Cc45 e Cc48, shown the better
results, can be potentials candidates as NC inactive phase markers and a uselles tool in disease
prognostic, and reinforcement to neuroimaging tests.
Palavras-chave
Neurocisticercose, Fase ativa, Fase inativa, Phage-display, Biopanning, IgY, Neurocysticercosis, Active phase, Inactive phase, Phage-display, Biopanning, Neurocisticercose - Parasito, Taenia
Citação
MANHANI, Marianna Nascimento. Seleção de peptídeos reconhecidos por imunoglobulinas Y anti-metacestódeo
de Taenia solium por phage display. 2009. 100 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2009.