Publicação: Isolamento e identificação de mimetopos de auto-antígenos para
utilização em imunodiagnóstico da artrite idiopática juvenil
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA
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Resumo
CAPITULO 1: A Artrite Idiopática Juvenil (AIJ) é uma doença auto-imune caracterizada por artrite
persistente, de causa desconhecida, que se inicia antes dos 16 anos de idade e está
presente há pelo menos 6 semanas após exclusão de outras doenças. Longos
períodos de AIJ ativa podem prejudicar o desenvolvimento do músculo, resultando em
um retardo do crescimento generalizado, uso limitato de alguns membros, erosões nas
articulações e menor capicidade aeróbica. É uma das mais prevalentes entre as
doenças reumáticas crônicas da infância, podendo acarretar incapacidade motora
permanente, afetando a qualidade de vida das crianças afetadas. O exame mais
importante para o diagnóstico da doença hoje é o exame físico que o pediatra ou
especialista faz na hora da consulta. O diagnóstico para AIJ é clínico, não depende de
exames laboratoriais porque ainda não existe nenhum teste que confirme a presença
da doença, não há exames laboratoriais considerados específicos para a sua definição
diagnóstica. Testes laboratoriais bioquímicos e marcadores sorológicos são úteis para
auxiliar no diagnóstico diferencial, classificar o subgrupo da doença, avaliar a extensão
da inflamação, determinar o prognóstico e resposta à terapia. Nesse sentido, a busca
por novos biomarcadores podem levar a novos métodos para o diagnóstico e
tratamento da AIJ. Essa revisão visa descrever alguns aspectos da Artrite Idiopática
Juvenil e como a tecnologia de Phage Display tem sido utilizada no mapeamento de
epitopos de diversos antígenos, constituintes de vários agentes causadores de
doenças. CAPITULO 2: As Artrites Idiopáticas Juvenis (AIJ) são um conjunto de doenças crônicas
caracterizadas por inflamação persistente das articulações, sendo os sinais
típicos desta inflamação a dor, inchaço e limitação dos movimentos. Idiopática
significa que não se sabe a causa da doença e juvenil , neste caso, significa que
o início dos sintomas acontece antes dos 16 anos de idade. O diagnóstico da AIJ
é clínico e baseia-se no achado de artrite em uma ou mais articulações, com
duração igual ou superior a 6 semanas. É fundamental que várias doenças, como
as infecções, sejam pesquisadas e afastadas, uma vez que a artrite é a
manifestação comum de várias doenças reumáticas e não-reumáticas. Por isso,
trabalhos que são direcionados a investigar novos biomarcadores tornam-se de
grande importância para o diagnóstico da AIJ. O objetivo deste estudo foi
selecionar e identificar através da metodologia de Phage Display, peptídeos
reconhecidos por anticorpos purificados a partir do soro de pacientes com AIJ.
Para seleção dos peptídeos foi realizado um bioppaning utilizando uma biblioteca
de peptídeos Ph.D.-C7C expressa na superfície do fago filamentoso M13. O DNA
dos clones selecionados foi sequenciado, traduzido, e os diversos clones foram
submetidos aos ensaios de ELISA e bioinformática. Dentre os 192 clones
sequênciados, 100 apresentaram sequências válidas, onde foram identificadas 40
sequências diferentes. As análises de bioinformática demonstraram que há
similaridades entre a maioria dos peptídeos selecionados e proteínas altamente
expressas em pacientes portadores de AIJ. O ensaio ELISA permitiu a prévalidação
de um clone com potencial biomarcador para o imunodiagnóstico
sorológico da Artrite Idiopática Juvenil.
Abstract
CHAPTER 2: Juvenile Idiopathic Arthritis (JIA) is a set of chronic diseases characterized by
persistent inflammation of joints. "Idiopathic" means that no one knows the cause
of illness and "Juvenile" in this case means that the onset of symptoms occurs
before 16 years of age. The diagnosis of JIA is clinical and is based on the finding
of arthritis in one or more joints, lasting less than six weeks. It is essential that
several diseases such as infections are investigated and removed, since arthritis is
a common manifestation of various rheumatic and non-rheumatic diseases.
Therefore, studies that are aimed at investigating new biomarkers become of great
importance for the diagnosis of JIA. The aim of this study was to select and
identify peptides recognized by antibodies purified from the serum of patients with
JIA by Phage Display technology. For selection of peptides was performed a
bioppaning using a peptide library Ph.D.-C7C expressed on the surface of
filamentous phage M13. The DNA from selected clones was sequenced,
translated, and several clones were subjected to ELISA assays and bioinformatics.
Among the 192 clones sequenced, 100 had valid sequences, which were identified
40 different sequences. The bioinformatics analysis showed that there are
similarities between most of the selected peptides and proteins highly expressed
in patients with JIA. ELISA allowed the pre-validation of a clone with a potential
biomarker for the serological immunodiagnosis of JIA.
Palavras-chave
Marcadores sorológicos, Phage Display, Imunodiagnóstico, Juvenile Idiopathic Arthritis, Phage Display, Immunodiagnostic, Artrite idiopática juvenil
Citação
ARAUJO, Galber Rodrigues. Isolamento e identificação de mimetopos de auto-antígenos para
utilização em imunodiagnóstico da artrite idiopática juvenil. 2011. 86 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011.