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Document type: Tese
Access type: Acesso Aberto
Title: Caracterização de peptídeos recombinantes associados à brucelose bovina e suas aplicações diagnósticas e vacinais
Author: Santos, Fabiana de Almeida Araújo
First Advisor: Goulart Filho, Luiz Ricardo
First member of the Committee: Azevedo, Vasco Ariston de Carvalho
Second member of the Committee: Mineo, Tiago Wilson Patriarca
Third member of the Committee: Cunha Junior, Jair Pereira da
Fourth member of the Committee: Pajuaba, Ana Cláudia Arantes Marquez
Fifth member of the Committee: Campos, Tatiana Amabile de
Summary: CAPÍTULO 2: A brucelose bovina é uma doença com grande impacto na produção animal e de repercussão na saúde humana. Estimativas mostram que a brucelose é responsável pela diminuição na produção de leite e de carne e pela redução da produção de bezerros. Apesar de testes diagnósticos oficiais e sensíveis serem utilizados, ainda não se tem um teste sorológico ideal para todas as situações epidemiológicas, pois são trabalhosos, complexos e de alto custo. Em relação às vacinas, buscam-se formulações vacinais protetoras diversas e que não interfiram no diagnóstico, mas somente as vacinas vivas atenuadas são efetivamente utilizadas nos programas de controle da brucelose. Neste trabalho, peptídeos recombinantes foram selecionados pela técnica de phage display, após três ciclos de seleção, utilizando uma biblioteca comercial Ph.D.-C7C contra anticorpos policlonais de animais positivos para brucelose. Nove clones foram selecionados, sequenciados, traduzidos. Dois peptídeos foram sintetizados quimicamente e verificamos suas potenciais aplicações diagnósticas e vacinais. Os peptídeos foram testados por ELISA com 80 soros positivos e negativos, e apresentaram uma sensibilidade de até 97,5% na detecção de anticorpos circulantes de animais com brucelose. Visando aplicação diagnóstica, o peptídeo Ba9 foi imobilizado sobre um eletrodo de grafite modificado com poli (3-HFA) e medidas voltamétricas foram realizadas na presença de soro positivo e negativo, que mostraram ser altamente efetivo para discriminar animais doentes, resultando em uma técnica simples, rápida e reprodutível podendo futuramente ser realizada em laboratórios ou em campo. Quanto aos ensaios vacinais em camundongos imunizados com extratos protéicos e a bactéria irradiada, demonstrou-se que as formulações vacinais com os peptídeos induziram uma resposta imune celular baseada na produção de TNFα, bem como uma resposta humoral com altos níveis de IgG2a e IgG1, sugerindo um provável efeito protetor, o que deve ser comprovado com infecção ativa em ensaios biológicos posteriores.
Keywords: Brucelose em bovino - Diagnóstico
Brucelose bovina - Vacina
Peptídeos
Brucelose
Diagnóstico
Biossensores
Vacinas
Phage display
Area (s) of CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA
Language: por
Country: BR
Publisher: Universidade Federal de Uberlândia
Institution Acronym: UFU
Department: Ciências Biológicas
Program: Programa de Pós-graduação em Genética e Bioquímica
Quote: SANTOS, Fabiana de Almeida Araújo. Caracterização de peptídeos recombinantes associados à brucelose bovina e suas aplicações diagnósticas e vacinais. 2011. 103 f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011.
URI: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15734
Date of defense: 27-Oct-2011
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