Publicação: Avaliação da descompactação da cromatina de espermatozoides bovinos
por três diferentes métodos
Carregando...
Tipo do documento
Data
Direito de acesso
Área do conhecimento
CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Autores
Orientador
Coorientador
Resumo
Reprodutores que possuem espermograma normal podem ser
classificados como subférteis ou passarem por períodos de subfertilidade, em
função de seu baixo desempenho reprodutivo. As alterações na descompactação da
cromatina dos espermatozoides em bovinos são possíveis explicações encontradas
para tais comportamentos. Diante disso, conduziu-se este trabalho, com o objetivo
de comparar três diferentes métodos de análises cromatínicas de espermatozóides
que possam ser usados em diagnósticos de fertilidade de touros. Sete amostras de
sêmen de bovinos subférteis foram avaliadas utilizando-se os três métodos, sendo
eles: coloração com alaranjado de acridina e análise por citometria de fuxo (Sperm
Chromatin Structure Assay - SCSA), coloração por azul de toluidina (AT) e
microscopia eletrônica de transmissão (MET). Nos esfregaços de sêmen corados
com AT foram avaliadas a descompactação e heterogeneidade da cromatina. Com o
SCSA avaliou-se a proporção de cabeças de espermatozoides coradas em vermelho
(cabeças anômalas) e em verde (cabeças normais). Na MET avaliou-se as áreas
das cabeças com descompactação da cromatina. Como análise estatística foi
utilizado o teste Kruskal-Wallis e como pós-teste, Wilcoxon. Também foi aplicado o
teste de correlação de Pearson. Obteve-se correlação positiva e significativa entre
SCSA e MET, além da correlação positiva e significativa entre AT e ME. Constatouse
a correlação negativa e significativa entre descompactação e heterogeneidade
por AT, entretanto não houve correlação significativa entre SCSA e AT. Concluiu-se
que a MET identifica alterações semelhantes às identificadas por SCSA, além de ser
mais sensível para identificação de alterações cromatínicas em espermatozoides de touro do que o SCSA e que a análise de imagem computacional de esfregaços
corados com AT não identifica as mesmas alterações identificadas pelo SCSA.
Abstract
Sires with a normal semen analysis can be classified as
subfertile or they can have periods of subfertility because of its low reproductive
performance. Changes in chromatin compaction of spermatozoa in cattle are found,
and they are possible explanations for this kind of behavior. Therefore, this study was
conducted with the objective to compare three different methods of analysis of sperm
chromatin that can be used in the diagnosis of fertility bulls.Seven semen samples of
subfertile cattle were evaluated using the three methods, which are them: flow
cytometry (SCSA), toluidine blue staining (TB) and transmission electron microscopy
(TEM). In samples stained with TB, semen samples were evaluated in case of
decompaction and heterogeneity of chromatin. The SCSA evaluated the proportion of
sperm heads stained in red (abnormal heads) and green (normal heads). In TEM
evaluated the areas of heads with unpacking chromatin. As statistics evaluations
were performed the Kruskal-Wallis test and as a post-test, Wilcoxon was also used.
The Pearson correlation test was also conducted. There was positive and significant
correlation between SCSA and TEM, besides the positive and significant correlation
between TB and TEM. It was found a negative correlation between unpacking of
chromatin and heterogeneity by TB, however there was no significant correlation
between SCSA and TB. It was concluded that TEM identifies similar changes as in
the SCSA test, and TEM is more sensitive for the identification of chromatin
alterations in bull sperm than SCSA, and the computational image analysis stained
with TB does not identify the same changes as in the SCSA.
Palavras-chave
Azul de Toluidina, Cromatina, Espermatozóide, Microscopia
eletrônica de transmissão, Sperm chromatin structure assay, Toluidine blue, Chromatin, Sperm, Transmission electron microscopy, Citometria de fluxo
Citação
FONSECA, Ludmila Angélica da. Evaluation of chromatin descompaction of cattle sperm by
three diferent methods. 2014. 52 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Agrárias) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2014. DOI https://doi.org/10.14393/ufu.di.2014.270