Publicação: Padrão de metilação da DMR do último éxon do gene IGF2 em ovócitos
e células do cumulus de vacas nelore
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CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
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Coorientador
Jacomini, Jose Octavio
Resumo
As biotecnologias de reprodução assistida são ferramentas essenciais à
pecuária moderna. Dentre estas, a produção in vitro de embriões (PIVE) se destaca,
colocando o Brasil como um dos países que mais produz e transfere embriões no
mundo. Apesar da PIVE proporcionar um aumento na produção de embriões por
animal, muito ainda se pode melhorar, sendo a qualidade do ovócito um dos aspecto
mais importante do sistema. Neste trabalho, objetivou-se avaliar o padrão de
metilação de uma região diferencialmente metilada (DMR) localizada no éxon 10 do
gene IGF2 em ovócitos e células do cumulus (CC) de folículos de 1 3 mm e ≥ 8,1
mm, imaturos e maturados de vacas Nelore. Os complexos cumulus-ovócitos (COC)
de folículos ≥ 8,1 mm apresentaram maior porcentagem de viáveis (40,5%) e de
maturação nuclear (60,6%). Os ovócitos imaturos de folículos de 1 3 mm foram
menos metilados (33,33% ± 34,79 %) que os de ≥ 8,1 mm (83,69% ± 8,52%). Após a
maturação, o padrão de metilação foi diferente entre os grupos de ovócitos, sendo
que os de folículos ≥ 8,1 mm maturados apresentaram menos metilação (18,51% ±
36,36%) que os de ≥ 8,1 mm imaturos (83,69% ± 8,52%) e os de 1 3 mm maturados
(49,62% ± 34,00%). Ao avaliar os ovócitos apenas por tamanho do folículo ou estado
de maturação, estes grupos não apresentaram diferenças significativas entre eles.
As CC, não apresentaram diferenças significativas para nenhum dos tratamentos
avaliados. O padrão menos metilado da DMR nos ovócitos de folículos ≥ 8,1 mm
maturados pode estar relacionado à maior competência destes, sendo que os
ovócitos de folículos de 1 3 mm podem ainda não estar com os padrões
imprinting completamente estabelecidos. Conclui-se que a DMR do último éxon do
gene IGF2 poderá ser usada como um marcador molecular para o status da
reprogramação epigenética em ovócitos, auxiliando a PIVE no desenvolvimento e
modificações de novos protocolos.
Abstract
Assisted reproductive biotechnologies are essential instrument for the modern cattle
breeding. In vitro embryo production (IVP) is prominence, situating Brazil as a
country that more produce and transfer in vitro embryos in the word. In spite of the
IVP big capacity to produce embryos per animal, this production can be better, being
the oocyte quality the more important aspect of the system. The objective of this
study was to evaluate the methylation pattern of the differentially methylated region
(DMR) in the exon 10 of the IGF2 gene in oocytes and cumulus cells (CC) from
immature and maturated nellore cows follicles.of 1 3 mm and ≥ 8.1 mm diameter.
Cumulus-oocytes complexes (COCs) from ≥ 8.1 mm follicles had greater
percentages of viable oocytes (40.5%) and nuclear maturation (60.6%). Immature
oocytes from 1 3 mm follicles were less methylated (33.33% ± 34.79 %) than those
immature from ≥ 8.1 mm follicles (83.69% ± 8.52%). After maturation, the methylation
pattern were different among oocytes groups, ≥ 8.1 mm maturated follicles showed
less methylation (18.51% ± 36.36%) than ≥ 8.1 mm immature follicles(83.69% ± 8.52%)
and 1-3 mm maturated follicles (49.62% ± 34.00%). When evaluating only the oocytes
by follicle size or maturation degree, these groups showed no significant differences
between them. The CC showed no significant differences among treatments
evaluated. The less methylated DMR pattern in the oocytes from ≥ 8.1 mm maturated
follicles can be related with greater competency of those oocytes, however oocytes
from 1 3 mm follicles can be with imprinting patters not completely established yet.
It is concluded that DMR of the last exon of the IGF2 gene can be used as a
molecular marker for epigenetic reprogramming status in oocytes, helping the IVP in
the development and changes of new protocols.
Palavras-chave
Epigenética, Metilação, Imprinting ,, Bos indicus, IGF2, Ovócito, DMR methylation pattern of the last éxon of the IGF2 gene in
oocytes and cumulus cells from nellore cows, Bovino - Reprodução, Genética animal
Citação
FAGUNDES, Nadia Simarro. Padrão de metilação da DMR do último éxon do gene IGF2 em ovócitos
e células do cumulus de vacas nelore. 2009. 68 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Agrárias) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2009.