Publicação: Análise da estrutura e identificação de proteínas da cromatina
nuclear espermática de bovinos
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MORFOLOGIA::CITOLOGIA E BIOLOGIA CELULAR
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Orientador
Coorientador
Beletti, Marcelo Emílio
Resumo
A cromatina espermática bovina é uma estrutura específica, complexa, e que ainda não
foi completamente elucidada. O presente estudo teve como objetivo purificar esta estrutura e
avaliar sua composição, bem como analisar sua morfologia. A purificação da cromatina foi
realizada através da remoção das membranas celulares, incluindo envoltório nuclear, seguido
de uma descondensação da cromatina resultante. Sua composição molecular foi analisada
pelas técnicas biofísicas de eletroforese, cromatografia liquida de alta performance e
espectofotometria de massa. Já sua morfologia foi analisada por microscopia eletrônica de
transmissão. Os resultados mostraram uma composição proteíca rica em variantes de histonas
H2B, queratinas, bem como uma transcriptase reversa e uma nucleoporina de 50kDa. As
micrografias mostraram uma estrutura que aparenta ser uma lâmina nuclear e as fibras de
matriz, e estruturas toroidais interligadas com esta malha de fibras de forma mais concentrada
nas proximidades da lâmina, além de uma estrutura em forma de bastão no centro do eixo
maior da cabeça espermática que esta vinculada a estas fibras de matriz e aos toróides
semelhantemente à lâmina nuclear.
Abstract
The sperm nuclear chromatin structure is a specific, complex, and that has not been
fully elucidated. This study aimed to isolate this structure and evaluate its composition, as
well as analyze their morphology. Purification of chromatin was performed by removing the
cell membrane and nuclear envelope followed by a decondensation of resulting chromatin. Its
molecular composition was analyzed by biophysical techniques of electrophoresis, highperformance
liquid chromatography and mass spectrometry. And its morphology was
analyzed by transmission electron microscopy. The results showed a protein composition rich
in variants of histone H2B, keratin, and a reverse transcriptase and a nucleoporin of 50 kDa.
The micrographs showed a structure that looks like a nuclear lamina and nuclear matrix
fibers, a toroidal structures intertwined with this mesh of fibers in a more concentrated near
the nuclear lamina, and a rod-shaped structure at the center of major axis of the head sperm
that bound to the fibers and the matrix toroids similarly to the nuclear lamina.
Palavras-chave
Cromatina, Espermatozóide, Bovino, Chromatin, Sperm, Bovine, Citologia, Bovino - Espermatozóides
Citação
MORANDI FILHO, Romualdo. Análise da estrutura e identificação de proteínas da cromatina
nuclear espermática de bovinos. 2013. 66 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biomédicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2013.