Publicação: Efeitos celular e molecular de peptídeo mimético à Argonauta 4 em linhagens celulares celulares protáticas
Carregando...
Tipo do documento
Data
Direito de acesso
Programa
Área do conhecimento
CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Autores
Orientador
Coorientador
Resumo
O Câncer de Próstata (CaP) é um importante problema de saúde pública com incidência e
mortalidade crescentes, em índices alarmantes. Seu diagnóstico precoce é imprescindível para
a cura, e se mostra desafiador, frente à uma doença assintomática e de crescimento lento. Nesse
cenário, RNAs não codificantes (ncRNA) têm emergido como moléculas-chave na
compreensão da biologia tumoral, destacando-se o Prostate Cancer Associated 3 (PCA3),
considerado um RNA longo não codificante (lncRNA) específico a condições malignas do
órgão. Esse gene encontra-se envolvido no controle da sobrevivência de células neoplásicas, na
regulação hormonal, na modulação da transição epitélio-mesenquimal e no processo de
angiogênese. Portanto, é notória a necessidade de melhor compreender seu mecanismo
transcricional, para assim definir novos caminhos terapêuticos contra o CaP. Propomos a
utilização da nanobioplataforma de Phage Display para a descoberta de ligantes regulatórios
do PCA3, visando modular sua expressão. Para isso, peptídeos ligantes à sua região promotora
e miméticos à Argonauta 4 (AGO4) foram previamente selecionados. No presente estudo, a
avaliação dos efeitos celulares mediados pelo tratamento com os fagos miméticos a AGO4 foi
conduzida por ensaios de MTT. Para a linhagem RWPE-1 (não tumorigênica), os tratamentos
por 24 horas com 10⁵ ufc e 48 horas com 10⁷ ufc foram citotóxicos (p< 0,05 e p< 0,01,
respectivamente). Para a linhagem LNCaP (hormônio responsiva) o tratamento por 24 horas
com 10⁵ ufc diminuiu a viabilidade celular. Já a 10⁹ ufc observou-se efeito proliferativo (p<
0,01). Para a linhagem PC3 (resistente à castração), após 48 horas, os fagos titulados a 10⁵ ufc
induziram a proliferação celular (p< 0,05). Quanto aos transcritos dos genes AGO4, PRUNE2
e PCA3, estes se mostraram superexpressos na linhagem LNCaP comparados à PC3. Após
tratamentos com as partículas fágicas, não foi verificada alteração na expressão mediada pelo
peptídeo mimético à AGO4. Como a expressão de PCA3 é regulada por andrógenos, sugerimos
que estudos posteriores sejam realizados sem a suplementação de soro. Além disso, fatores
transcricionais adicionais também devem ser incluídos, uma vez que hipotetizamos que apenas
a AGO4 não seja suficiente na ativação do promotor do gene PCA3.
Abstract
Prostate cancer (PCa) is an important public health problem with increasing incidence and
mortality rates. The early diagnosis is essential for curing. However, the disease is challenge
due to no specific symptoms and slow progression. In this scenario, non-coding RNAs have
emerged as key molecules for understanding the tumor biology. Notably the Prostate Cancer
Associated 3 (PCA3), a long non-coding RNA (lncRNA), is a specific marker for PCa,
associated with neoplastic cell control, hormone regulation, epithelial mesenchymal transition
and angiogenesis processes. In this context, is needed to better understand its transcriptional
mechanism to define new therapeutic targets. We explored Phage Display nanoplatform for the
discovery of PCA3 regulatory ligands, aiming to modulate its expression. Mimetic peptides to
Argonauta 4 (AGO4) were previously selected by our group. In the present study, we evaluated
the effects of AGO4 mimetic phages in prostate cells through MTT assays. For RWPE-1 (nontumorigenic) cell line, treatments for 24 hours at 10⁵ cfu and 48 hours at 10⁷ cfu were cytotoxic
(p< 0.05 and p< 0.01, respectively). For LNCaP (responsive hormone) cell line, treatment for
24 hours with 10⁵ cfu decreased cell viability, and with 10⁹ cfu (p< 0.01) presented proliferative
effect. For PC3 (castration resistant) cell line, after 48 hours, phages titrated at 10⁵ cfu induced
cell proliferation (p< 0.05). Considering qPCR assays, AGO4, PRUNE2 and PCA3 genes are
overexpressed in LNCaP lineage compared to PC3. After treatment with phage particles, no
change in AGO4 mimetic peptide-mediated expression was observed. As PCA3 expression is
regulated by androgens, we suggest that further studies may be performed without serum
supplementation. In addition, other transcriptional factors should also be included as we
hypothesize that AGO4 alone do not activate PCA3 expression.
Palavras-chave
Câncer de próstata, lncRNA, Peptídeo recombinante
Citação
SILVA, Luisa Nogueira e. Efeitos celular e molecular de peptídeo mimético à Argonauta 4 em linhagens celulares prostáticas. 2019. 57 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biotecnologia) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2019.
DOI
Avaliação
Revisão
Suplementado Por
Referenciado Por
Licença Creative Commons
Exceto quando indicado de outra forma, a licença deste item é descrita como Acesso Aberto