Publicação: Produção de alérgenos recombinantes relacionados a Der p 1 de Dermatophagoides pteronyssinus com potencial aplicação na avaliação da resposta imune humoral e celular em pacientes com alergias respiratórias
Carregando...
Arquivos
Tipo do documento
Data
Direito de acesso
Coleções
Área do conhecimento
CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Autores
Orientador
Coorientador
Napolitano, Danielle Reis
Resumo
Dermatophagoides pteronyssinus (Dp) é uma importante espécie de ácaro da poeira domiciliar e está associado com doenças alérgicas. Alérgenos de Dp são causas importantes de sensibilização e resposta mediada por imunoglobulina E (IgE) entre pacientes com asma e rinite alérgica. O objetivo deste estudo foi produzir as proteínas recombinantes Der p 1 e os epítopos ligantes de IgE relacionados com a proteína Der p 1 (fragmento com os aminoácidos 172-243 (rDer p 1172-243)) para avaliar sua reatividade a IgE no soro de indivíduos sensibilizados ao ácaro usando ensaio imunoenzimático. A sequência de Der p 1 total e Der p 1172-243 foram amplificados e subclonados em E. coli. Após a expressão e a purificação, a reatividade de IgE para rDer p 1 e rDer p 1172-243 foi determinada por ELISA. Os resultados demonstraram que a proteína rDer p 1 expressa em E. coli apresentou um peso molecular estimado de 26 kDa e rDer p 1172-243 aproximadamente 8kDa. A proteína Der p 1 expressa e rDer p 1172-243 reagiu positivamente a IgE em 88% e 84% nos soros de pacientes alérgicos, respectivamente. Entretanto, soros de pacientes negativos demonstrou reatividade cruzada para rDer p 1, conquanto o mesmo não foi observado com rDer p 1172-243. Pode-se sugerir que rDer p 1 172-243 são candidatos promissores para o diagnóstico de alergia causada por D. pteronyssinus em pacientes sensibilizados a este ácaro.
Abstract
Dermatophagoides pteronyssinus (Dp) is an important specie of house dust mite associated with allergic diseases. Allergens from Dp are important causes of sensitization and mediated responses to specific immunoglobulin E (IgE) among patients with asthma and allergic rhinitis. The aim of this study was to produce recombinant protein Der p 1 and Der p 1-related IgE binding epitopes (rDer p 1172-243) to evaluate their reactivity to IgE in the serum of mite sensitized individuals using enzyme immunoassays. The sequences of rDer p 1 and rDer p 1172-243 were amplified and subcloned into E. coli. After expression and purification the reactivity of IgE to rDer p 1 and rDer p1172-243 was determined by ELISA. The results showed that rDer p 1 expressed in E. coli presented an estimated molecular weight of about 26 kDa and rDer p 1172-243 about 8kDa. The expressed rDer p 1 protein and rDer p 1172-243 reacted positively with IgE in 88% and 84% of sera from allergic patients, respectively. However, sera from negative patients showed crossreactivity to rDer p 1, although the same was not observed for rDer p 1172-243. It can be suggested that rDer p 1172-243 are promising candidates for the diagnosis of allergy caused by D. pteronyssinus in mite sensitized patients.
Palavras-chave
Alergia, Dermatophagoides pteronyssinus, Alérgenos recombinantes, Allergy, Recombinant allergens, Imunologia
Citação
TOMAZ, Laura Fontes. Produção de alérgenos recombinantes relacionados a Der p 1 de Dermatophagoides pteronyssinus com potencial aplicação na avaliação da resposta imune humoral e celular em pacientes com alergias respiratórias. 2011. 81 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011.