Publicação: Reatividade de anticorpos IgE, IgG1 e IgG4 a frações
glicopeptídicas de Dermatophagoides pteronyssinus em
indivíduos alérgicos e não alérgicos
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA::IMUNOLOGIA APLICADA
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Orientador
Coorientador
Silva, Deise Aparecida de Oliveira
Resumo
Ácaros da poeira domiciliar, como Dermatophagoides pteronyssinus (Dp) são
importantes fontes de alérgenos envolvidos na sensibilização de indivíduos
geneticamente predispostos. Vários alérgenos são constituídos de glicoconjugados,
que apresentam afinidade com lectinas, como a Concanavalina A (ConA). O objetivo
deste estudo foi avaliar a reatividade de IgE, IgG1 e IgG4 aos componentes do
extrato Dp não ligantes e ligantes à ConA em pacientes alérgicos e indivíduos não
alérgicos. As frações não ligantes (FNL) e ligantes (FL) de ConA foram obtidas do
extrato Dp bruto após o fracionamento por cromatografia de afinidade de ConASepharose
e todos os extratos foram avaliados por ELISA e Immunoblotting para
detecção de IgE, IgG1 e IgG4 no soro de 95 pacientes alérgicos a ácaros (DP+) e 92
indivíduos não alérgicos (NA). Em pacientes do grupo DP+, a soropositividade de
IgE e IgG1 ao extrato Dp bruto (100% e 84,2%, respectivamente) foi maior do que às
demais frações, enquanto a soropositividade de IgG4 foi maior à FL (83,2%), quando
comparado aos demais extratos. Curiosamente, a soropositicbbvidade de IgG4 às
frações relacionadas à ConA foram maiores no grupo DP+ comparados ao grupo
NA, especialmente à FL. O ELISA de inibição competitiva para todos os anticorpos
testados representou uma alta (>80%) reatividade cruzada entre o extrato Dp bruto e
frações relacionadas à ConA ou extrato de D. farinae (>70%). Entretanto, inibições
menores foram encontradas para IgG1 (67%) e IgG4 (33%), mas não para IgE, quando
utilizado o extrato de Blomia tropicalis. O Immunoblotting revelou bandas
imunodominantes reconhecidas por IgE (14 e 25kDa) e IgG4 (25 e 88kDa) em maior
quantidade no extrato Dp e FNL, ao passo que IgG1 reconheceu somente bandas
acima de 78kDa, principalmente no extrato Dp bruto. Frações não ligantes e ligantes
de ConA derivadas de D. pteronyssinus apresentam alta reatividade cruzada e se
constituem de componentes capazes de induzir a síntese de IgE em pacientes
alérgicos, além de IgG1 e IgG4 em indivíduos alérgicos e não alérgicos.
Abstract
House dust mites as Dermatophagoides pteronyssinus (Dp) are considered important
allergen sources for sensitization of genetically predisposed subjects. Several
allergens are commonly constituted by glycoconjugates that may have affinity with
lectins, such as Concanavalin A (ConA). The aim of this study was to evaluate IgE,
IgG1 and IgG4 reactivity to ConA-related components from Dp extract in allergic
and non-allergic subjects. ConA-bound and ConA-unbound components were
obtained from Dp crude extract after fractionation on ConA-Sepharose affinity
chromatography and all extracts were evaluated by ELISA and immunoblotting for
detection of IgE, IgG1, and IgG4 in sera from 95 mite-sensitized patients (DP+)and 92
non-allergic (NA) subjects. In DP+ patients, IgE and IgG1 seropositivity to crude Dp
extract was higher (100% and 84,2%, respectively) than to ConA-related extracts,
while IgG4 seropositivity was higher to ConA-bound Dp (83,2%) as compared to
other Dp extracts. Interestingly, IgG4 seropositivity to ConA-related Dp extracts,
especially ConA-bound Dp, was higher in DP+ than NA subjects. Inhibition ELISA
for all antibody isotypes showed a high (>80%) cross-reactivity between crude Dp
and ConA-related extracts or D. farinae extract (>70%). However, partial inhibition
for IgG1 (67%) and IgG4 (33%), but not for IgE, was found when using Blomia
tropicalis extract. Immunoblotting revealed immunodominant bands recognized by
IgE (14 and 25 kDa) and IgG4 (25 and 88 kDa) mostly in crude Dp and ConAunbound
extracts, whereas IgG1 recognized bands above 78 kDa mainly in crude Dp
extract. ConA-bound and ConA-unbound Dp extracts demonstrate high crossreactivity
and are constituted by components that are able to induce IgE synthesis in
allergic patients, and IgG1 and IgG4 in allergic and non allergic subjects.
Palavras-chave
Glicoconjugados, Dermatophagoides pteronyssinus, IgE, IgG1, IgG4, Concanavalin A, Dermatophagoides pteronyssinus, Allergy, Alergia
Citação
RESENDE, Rafael de Oliveira. Reatividade de anticorpos IgE, IgG1 e IgG4 a frações
glicopeptídicas de Dermatophagoides pteronyssinus em
indivíduos alérgicos e não alérgicos. 2009. 127 f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2009.