Publicação: Desenvolvimento e validação de dispositivos de transporte e armazenamento de saliva a seco (DTASS) para recuperação de metabólitos da fração lipídica salivar utilizando espectrometria de massas
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CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::ODONTOLOGIA
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Caixeta, Douglas Carvalho
Resumo
Introdução: A utilização da saliva como biofluido diagnostico tem despertado crescente
interesse científico devido ao procedimento simples, rápido, seguro, não invasivo e de fácil
armazenamento, e tem potencial de refletir alterações metabólicas presentes no organismo.
Além disso, a presença de diversos metabólitos e lipídios torna esse fluido uma fonte
promissora para a investigação de biomarcadores associados a diferentes condições fisiológicas
e patológicas. Objetivo: Desenvolver e otimizar um dispositivo de transporte e armazenamento
de saliva à seco (DTASS) para a recuperação de metabólitos da fração rica em lipídeos
salivares, avaliando diferentes condições de extração baseadas em misturas de diclorometano e
metanol. Método: Trata-se de um estudo transversal realizado com indivíduos saudáveis
atendidos no Ambulatório de Endocrinologia do Hospital de Clínicas da Universidade Federal
de Uberlândia. As amostras de saliva não estimulada foram coletadas de forma padronizada e
aplicadas em diferentes suportes de papel destinados à secagem e preservação da amostra.
Posteriormente, foram testadas distintas condições de extração utilizando combinações de
diclorometano e metanol em diferentes proporções, com o propósito de identificar a estratégia
mais eficiente para a recuperação dos compostos lipídicos. Após a etapa de preparo, os extratos
obtidos foram analisados por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas,
permitindo a caracterização do perfil metabólico e lipídico das amostras. Resultados: A
proporção 1:1 (diclorometano:metanol) apresentou maior eficiência na recuperação de
metabólitos lipídicos em comparação à proporção 2:1, tanto no papel NuPAD (70,5%) quanto
no Whatman 903 (69,8%). Na comparação entre as plataformas na condição 1:1, o Whatman
903 apresentou maior abundância relativa para 56,3% dos metabólitos identificados, enquanto
o NuPAD apresentou maior abundância para 43,7%. Apesar da ligeira superioridade do
Whatman 903, o NuPAD demonstrou desempenho analítico semelhante, evidenciando seu
potencial como alternativa de baixo custo para análises metabolômicas da fração lipídica.
Conclusões: o DTASS constitui uma ferramenta promissora para aplicações lipidômicas
baseadas em saliva seca, oferecendo uma abordagem acessível e eficiente para a preservação
de amostras biológicas. Sua utilização poderá contribuir para a ampliação de estudos voltados
à descoberta de biomarcadores, favorecendo o desenvolvimento de estratégias diagnósticas
mais práticas e ampliando as possibilidades de aplicação da medicina de precisão em diferentes
contextos clínicos e científicos.
Abstract
Introduction: The use of saliva as a diagnostic biofluid has attracted growing scientific interest
due to its simplicity, speed, safety, non-invasiveness, and ease of storage, and it has the potential
to reflect metabolic changes occurring in the body. Furthermore, the presence of various
metabolites and lipids makes this fluid a promising source for the investigation of biomarkers
associated with diferente physiological and pathological conditions. Objective: To develop and
optimize a dry saliva transport and storage device (DTASS) for the recovery of metabolites
from the lipid-rich fraction of saliva, evaluating different extraction conditions based on
mixtures of dichloromethane and methanol. Method: This is a cross-sectional study conducted
with healthy individuals treated at the Endocrinology Outpatient Clinic of the Hospital de
Clínicas of the Federal University of Uberlândia. Samples of unstimulated saliva were collected
using a standardized method and applied to different paper supports designed for drying and
preserving the sample. Subsequently, different extraction conditions were tested using
combinations of dichloromethane and methanol in various ratios, with the aim of identifying
the most efficient strategy for recovering lipid compounds. After the preparation step, the
extracts obtained were analyzed by liquid chromatography coupled with mass spectrometry,
allowing for the characterization of the metabolic and lipid profiles of the samples. Results:
The 1:1 ratio (dichloromethane:methanol) showed greater efficiency in the recovery of lipid
metabolites compared to the 2:1 ratio, both on NuPAD paper (70.5%) and on Whatman 903
(69.8%). In the comparison between the platforms under the 1:1 condition, Whatman 903
showed higher relative abundance for 56.3% of the identified metabolites, while NuPAD
showed higher abundance for 43.7%. Despite the slight superiority of Whatman 903, NuPAD
demonstrated similar analytical performance, highlighting its potential as a low-cost alternative
for metabolomic analyses of the lipid fraction. Conclusions: DTASS is a promising tool for
dry-saliva-based lipidomic applications, offering an accessible and efficient approach to the
preservation of biological samples. Its use may contribute to the expansion of studies aimed at
biomarker discovery, facilitating the development of more practical diagnostic strategies and
broadening the scope of precision medicine applications in various clinical and scientific
contexts.
Palavras-chave
saliva, lipidômica, metabolômica, biomarcadores, espectrometria de massas, lipidomics, metabolomics, biomarkers, mass spectrometry
Citação
SEBAIO, Mariana Cristina. Desenvolvimento e validação de dispositivos de transporte e armazenamento de saliva a seco (DTASS) para recuperação de metabólitos da fração lipídica salivar utilizando espectrometria de massas. 2026. 39 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Odontologia) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2026.
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