Publicação: Desenvolvimento de bioeletrodo conjugado a anticorpos policlonais IgY anti-BnSP-7 que detectam frações antigênicas de Leishmania spp.: Uma potencial ferramenta imunodiagnóstica para leishmaniose
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::QUIMICA DE MACROMOLECULAS, CNPQ::CIENCIAS EXATAS E DA TERRA::QUIMICA::QUIMICA ANALITICA::ELETROANALITICA, CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA::IMUNOQUIMICA
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Borges, Isabela Pacheco
Resumo
Fosfolipases A2 (PLA2) são enzimas encontradas em muitos organismos e sua presença em parasitos tem sido relacionada com seu potencial de virulência e pode ser um alvo importante para estudos de diagnóstico de doenças parasitárias. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o maior índice ELISA utilizando o anticorpos policlonais IgY anti-BnSP-7, obtidos da imunização de galinhas com uma PLA2 da peçonha de Bothrops pauloensis, e anticorpos policlonais IgY PBS obtidos da imunização de galinhas com PBS (controle negativo) contra extratos proteicos de L. (L.) amazonensis, L. (V.) braziliensis e L. (L.) infantum com a finalidade de construir um bioeletrodo. Os resultados do ensaio de ELISA demonstraram que os anticorpos policlonais IgY anti-BnSP7 apresentaram Índice ELISA (IE) maior que 1,2 para todos os extratos proteicos de Leishmania avaliados, o que não foi observado quando se utilizou os anticorpos policlonais IgY PBS. O extrato de L. (L.) infantum foi utilizado como alvo na produção de um bioeletrodo por apresentar o maior IE. No bioeletrodo, foi observado que na ausência de biomoléculas, ou seja, apenas no eletrodo de grafite com o nanocompósito (NC), a corrente do pico de oxidação resultante é maior (1129,4 μA), porém ao imobilizar os anticorpos a corrente reduz aproximadamente 176 µA para sonda negativa (NC/IgY-) e 193,3 µA para a sonda positiva (NC/IgY+). Além disso, o bioeletrodo contendo o anticorpo IgY anti-BnSP7 foi eficaz em reconhecer o extrato proteico obtido de Leishmania infantum, diminuindo a corrente elétrica para aproximadamente 623 μA ao contrário dos anticorpos IgY-PBS que não diminuíram a corrente elétrica assim como os bioeletrodos que contém apenas sonda. Os resultados oriundos deste trabalho demonstram a capacidade dos anticorpos IgY anti-BnSP-7 em reconhecer proteinas de Leishmania e sua especificidade quando comparados com anticorpos policlonais IgY PBS. A utilização de anticorpos anti-PLA2 pode constituir-se numa ferramenta importante para o diagnóstico de doenças parasitárias por meio da utilização de bioeletrodos. No entanto, novos estudos devem ser conduzidos na tentativa de otimizar a construção dos biossensores como por exemplo, com a elaboração de uma curva de calibração, ensaios de estabilidade e regeneração do bioeletrodo.
Abstract
Palavras-chave
Anticorpo policlonal IgY, Bioeletrodo, Leishmania, Fosfolipase A2
Citação
MENDES, Jean Carlos Teixeira. Desenvolvimento de bioeletrodo conjugado a anticorpos policlonais IgY anti-BnSP-7 que detectam frações antigênicas de Leishmania spp.: Uma potencial ferramenta imunodiagnóstica para leishmaniose. 2020. 44 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biotecnologia) – Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2021.