Publicação: Extração de DNA de Coffea arabica L.
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA
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Resumo
O cafeeiro é uma espécie conhecida no mundo todo, e o Brasil é o maior produtor de café, especialmente Coffea arabica L. Uma das etapas mais importantes para a realização de análises genéticas, dentro de programas melhoramento genético, é a extração de DNA. Os principais métodos para a extração de DNA de plantas têm como base o CTAB (brometo de
cetiltrimetilamônio), entretanto, esses métodos não possuem várias etapas e o custo com reagentes é alto. Este trabalho teve como objetivo avaliar um método de extração de DNA de C. arabica, que seja rápido, eficiente e simples. O protocolo utilizado neste trabalho tem como base SDS (dodecil sulfato de sódio) e Triton X-100. Após a extração os DNAs foram quantificados, qualificados e utilizados para corte com enzima EcoRI e amplificação da região ribossômica ITS1/ITS4. O protocolo foi eficiente para extrair grande quantidade de DNA, porém, a pureza e a qualidade não foram ideais. Nenhuma amostra teve o padrão desejado para as relações A260/280 nm e A260/230 nm, 80 % das amostras apresentaram DNA íntegro, 75 % tiveram o DNA digerido pela EcoRI e 60 % amplificaram a região ribossômica. Isto faz com que novos ajustes devam ser feitos neste protocolo para a obtenção de DNA de qualidade e pureza para ser utilizado em estudos moleculares de C. arábica. Conclui-se que o protocolo aqui apresentado é promissor para a extração de DNA de café, pois, os protocolos atualmente utilizados consomem muito tempo e reagentes, e alguns dos reagentes são tóxicos, tornando esses protocolos insustentáveis para análises moleculares.
Abstract
Palavras-chave
Café, SDS, Triton X-100
Citação
GOMES, Marilia de Lima.Extração de DNA de Coffea arabica L. 2019. 25 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biotecnologia) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2019.