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Clonagem da sequência codificante da Bhalternina, uma serinoprotease de Bothrops alternatus (Urutu), para expressão na levedura Pichia pastoris

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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA::MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL E DE FERMENTACAO

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A Bhalternina é uma serinoprotease isolada da peçonha de Bothrops alternatus e apresenta atividade proteolítica que afeta a coagulação sanguínea. Purificar essa proteína da peçonha da serpente depende de um processo complexo e a quantidade obtida é restrita. Portanto, o objetivo deste trabalho é a clonagem e obtenção do clone de levedura para a expressão da enzima Bhalternina. Primeiramente foi realizado a construção do plasmídeo com a sequência que codifica a enzima, obtendo o clone de bactéria que o contém. Esse plasmídeo foi utilizado para a obtenção do clone de levedura para futura expressão heteróloga da proteína. Neste trabalho, foi possível obter o clone da levedura Pichia pastoris com o gene que expressa a Bhalternina. O resultado da PCR confirmou que o clone apresentou o DNA que codifica a proteína de interesse, possibilitando a continuidade do estudo, em etapa futura, com experimentos de expressão da proteína no sistema de levedura.

Abstract

Palavras-chave

Expressão, Bhalternina, Pichia, Levedura, Clonagem, Serinoprotease

Citação

COLICHIO, Gabriela Borges Cherulli. Clonagem da sequência codificante da Bhalternina, uma serinoprotease de Bothrops alternatus (Urutu), para expressão na levedura Pichia pastoris. 2017. 47 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biotecnologia) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2017.

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