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Proteínas diferencialmente expressas no cérebro após dieta rica em carboidratos refinados e tratamento com glibenclamida

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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA

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Resumo

O consumo mundial de açúcar está acima do recomendado, segundo a Organização Mundial da Saúde. No entanto, pouco se sabe sobre seus efeitos no sistema nervoso central quanto à expressão de proteínas. A fim de investigar a expressão diferencial de proteínas no cérebro de camundongos Balb/c alimentados com uma dieta rica em carboidratos refinados e tratados com glibenclamida, ensaio bioquímico foi realizado com o sobrenadante desse tecido. Camundongos machos foram alimentados com dieta high carbohydrate durante oito semanas e tratados ou não com glibenclamida (20 mg/kg) por 4 semanas. Os animais foram eutanasiados por decapitação sob anestesia. Os cérebros foram homogeneizados em solução tampão TrisHCl pH 7,5 seguido de centrifugação. Alíquota do sobrenadante foi submetida à dosagem de proteína total e o restante da amostra foi tratada com tampão desnaturante. Para SDS-PAGE 12,5%, 10 µg/µL de proteína foram aplicadas em cada poço e após a corrida, o gel foi corado e descorado. A medida de referência das bandas do gel foi feita usando padrão de massa molecular relativa (MW, SDS-7B2). As bandas diferenciais foram analisadas no programa Scion e a expressão em pixel foi analisada em médias e pelo teste t utilizando o software BioEstat, sendo valores de p < 0,05 considerados significativos. A comparação do perfil eletroforético revelou as mesmas bandas proteicas nos grupos controle e tratado com glibenclamida, porém com expressão diferencial, sendo elas estimadas com massa molecular (em kDa) de 91,4; 86,2; 72,1; 58,6; 53,6; 44,8; 42,2; 39,8; 27,1 e 18,9. As proteínas estimadas em 44,8; 42,2 e 39,8 KDa estão mais significativamente expressas no cérebro dos indivíduos tratados com glibenclamida, uma sulfonilureia indicada no tratamento da hiperglicemia e do diabetes mellitos. Essas proteínas diferenciais são candidatas à análise proteômica e são alvo de futuros estudos de predição e biologia computacional.

Abstract

Palavras-chave

Sulfonilureia, Perfil eletroforético, Dieta isocalórica

Citação

FARIA, Sttefany Nayara Sant’Ana. Proteínas diferencialmente expressas no cérebro após dieta rica em carboidratos refinados e tratamento com glibenclamida. 2023. 27 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Ciências Biológicas) – Universidade Federal de Uberlândia, Ituiutaba, 2023.

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