Publicação: Compactação da cromatina e morfometria de espermatozóides
bovinos selecionados e capacitados
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CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
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Resumo
Com o intuito de melhorar a eficiência na obtenção de embriões
viáveis em processos de fertilização in vitro, métodos de seleção e concentração
de espermatozóides são utilizados. No entanto, pouco se sabe sobre a ação
destes métodos sobre a compactação da cromatina e a morfometria da cabeça
dos espermatozóides. Da mesma forma o efeito da capacitação espermática in
vitro sobre essas características espermáticas é controverso. No presente estudo
avaliou-se a ação da seleção de espermatozóides por gradiente de Percoll e
swim-up e da capacitação espermática in vitro por heparina sobre a
compactação da cromatina e a morfometria da cabeça de espermatozóides
bovinos. Dezoito amostras de sêmen foram submetidas aos dois métodos de
seleção e posterior capacitação. Esfregaços foram confeccionados em todas as
etapas e corados pelo método de metacromasia induzida por azul de toluidina
(AT). As imagens digitalizadas obtidas foram processadas em programas
desenvolvidos em ambiente SCILAB. Observou-se que após a seleção por
gradiente de Percoll e swim up os espermatozoides tendem a possuir cromatina
mais frouxa e mais heterogênea. O método swim up selecionou cabeças mais
simétricas, menores e com menor variação no tamanho quando comparadas a
mesma amostra de sêmen anteriormente à seleção. Após a capacitação induzida
por heparina os espermatozoides apresentaram cromatina mais frouxa e leve
alteração da forma da cabeça.
Abstract
Aiming to improve the efficiency in obtaining viable embryos in in
vitro fertilization procedures, sperm selection and concentration methods are
used. However little is known about the action of these methods on the
chromatin condensation and sperm head morphometry. Likewise the effect of
sperm in vitro capacitation on these characteristics is controversial. This study
evaluated the effect of sperm selection by Percoll gradient, "swim-up procedure
and sperm capacitation in vitro by heparin on chromatin condensation and
sperm head morphometry of cattle. Eighteen semen samples were subjected to
both methods of selection and subsequent capacitation tests. Smears were
made at every stage and stained by the metachromasia method induced by
toluidine blue (AT). The scanned images were processed in software developed
in an SCILAB environment. It was observed that after selection by gradient of
Percoll and "swim up" the sperm tend to have looser and more heterogeneous
chromatin. The "swim up" method selected heads more symmetrical, smoller
and with less size variation when compared to the same semen sample prior to
selection. After heparin-induced capacitation the spermatozoa presented looser
crhomatin and slight change of the head.
Palavras-chave
Azul de toluidina, Condensação, Gradiente de Percoll, Heparina, Swim-up, Toluidine-blue, Condensation, Percoll gradient, Heparin, Bovino - Reprodução, Reprodução animal
Citação
CAMPOS, Marília Nogueira da Gama. Compactação da cromatina e morfometria de espermatozóides
bovinos selecionados e capacitados. 2010. 55 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Agrárias) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2010.