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Fracionamento da peçonha da serpente Bothrops alternatus e determinação da atividade proteolítica de suas frações isoladas

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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA

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Resumo

O presente trabalho descreve o fracionamento da peçonha bruta de Bothrops alternatus e a caracterização de suas frações isoladas quanto à atividade proteolítica e perfil eletroforético. A peçonha foi fracionada em DEAE Sephacel, previamente equilibrada em tampão bicarbonato de amônio 0,05 M, num gradiente de concentração de 0,05 a 1,0 M, apresentando um perfil cromatográfico de seis frações principais, denominadas de D1 a D6. Todas as frações (D1 a D6) degradaram a caseína e as cadeiras A-α e B-β do fibrinogênio bovino em pH 7,0-9,0. uma fibriogenase, denominada MPA, foi purificada a partir do refracionamento da fração D6 em Sephadex G-75, seguida por Heparina Agarose. Em eletroforese em gel de poliacrilamida, MPA se comportou como uma proteína de cadeia simples com peso molecular aprente de 29.000, na presença de β-mercaptoetanol. A enzima degrada a caseína e fibrina. A MPA hidrolisa a cadeira A-α mais rapidamente que a cadeia B-β, mas não altera a cadeia γ do fribrinogênio. A atividade fibrinogenolítica na MPA foi inibida pela 1,10-fenantrolina. Resultados preliminares mostraram que MPA foi capaz de tornar o sangue de camundongos incoagulável.

Abstract

Palavras-chave

Bothrops alternatus, Peçonha, Fibrinogenase

Citação

COSTA, Júnia de Oliveira. Fracionamento da peçonha da serpente Bothrops alternatus e determinação da atividade proteolítica de suas frações isoladas. 47 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Ciências Biológicas) – Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2003.

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