Publicação: Reatividade de anticorpos a frações antigênicas de
Strongyloides venezuelensis no diagnóstico diferencial da
estrongiloidíase humana
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA::IMUNOLOGIA APLICADA
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Coorientador
Cunha Junior, Jair Pereira da
Resumo
Strongyloides stercoralis, nematódeo parasita intestinal, é um dos responsáveis pelas
infecções parasitárias mais prevalentes em humanos. A detecção precoce previne o
desenvolvimento das síndromes clínicas de hiperinfecção e disseminação. Na procura por
marcadores de resposta imune na estrongiloidíase, as propriedades antigênicas de
componentes glicosilados de Strongyloides e o desempenho da avidez de anticorpos IgG
foram testados em imunoensaios. Considerando a importância do imunodiagnóstico da
estrongiloidíase e a capacidade de ligação a carboidratos das lectinas, como
concanavalina-A (Con-A), foram testados o extrato salino total de larvas filarioides de
Strongyloides venezuelensis (ES) e suas frações obtidas em coluna com Con-A: não ligante
(FNL Con-A) e ligante Con-A (FL Con-A) na detecção de imunoglobulinas (IgG e IgA). A
determinação de avidez de IgG foi realizada para detectar pacientes com estrongiloidíase
e caracterizar origens de discrepância entre sorologia e coproparasitologia. Sensibilidade
(Se), especificidade (Es), area under curve (AUC), likelihood ratio (LR) e coeficientes de
correlação foram calculados; a análise estatística foi feita pelos testes de Mann Whitney
e exato de Fisher. FNL Con-A mostrou os melhores parâmetros diagnósticos para
detecção de IgG (Se 95,0%, Es 92,5%, AUC 0,99, LR 12,7) e alta correlação (r = 0,700) com
o ES. As frações não demonstraram claramente utilidade na detecção de IgA. Índice
avidez (IA) foi calculado para cada amostra de soro considerando: (a) IA de triagem
(diluição 1:160) e (b) IA médio a diferentes diluições. Para diferenciar os grupos nos IA de
triagem e médio foi estabelecido limiar de 75% (p < 0,001). Immunoblot avidez foi
auxiliar para a análise de casos discrepantes no ELISA e serviu como ferramenta
complementar na identificação de antígenos responsáveis pela maturação da afinidade.
Concluiu-se que FNL Con-A demonstrou conter fonte importante de peptídeos
específicos eficientes na detecção de IgG no imunodiagnóstico da estrongiloidíase; e o
ensaio de avidez de IgG distinguiu infecção ativa por S. stercoralis com eliminação de
larvas dos casos suspeitos ou falso positivos.
Abstract
Strongyloides stercoralis, a human intestinal nematode, causes one of the most common
worldwide parasitic infections. Early detection prevines the development of
disseminated and hyperinfection syndromes. In search for immune response markers for
strongyloidiasis, antigenic properties of glycosylated components from Strongyloides and
IgG avidity performance were tested in immunoassays. Considering sugar-binding
capacity of lectins, as concanavalin-A (Con-A) and immunodiagnosis importance we
tested total saline extract of Strongyloides venezuelensis filariform larvae (SE) and its
fractions obtained in Con-A column: Con-A unbound (Con-A UF) and Con-A bound (Con-A
BF) in immunoglobulin detection (IgG and IgA). IgG avidity determination was
investigated to detect patients with strongyloidiasis and characterize sources of
disagreement between serology and coproparasitology. Sensitivity (Se), specificity (Sp),
area under curve (AUC), likelihood ratio (LR), and correlation coefficients were
calculated, statistical analyzes were performed by Mann Whitney and Fisher exact test.
Con-A UF showed the highest diagnostic parameters for IgG detection (Se 95.0%, Sp
92.5%, AUC 0.99, LR 12.7) and high correlation (r = 0.700) with SE. Con-A fractions did not
clearly demonstrate usefulness for IgA detection. Avidity index (AI) was calculated to
each serum considering: (a) screening AI (serum 1:160) and (b) mean of AI at different
dilutions. To differentiate groups at screening and mean AI a value of 75% was
established (p < 0.001). Avidity immunoblot was auxiliary for ELISA data analysis of
discrepant cases and served as a complementary tool for identifying antigens responsible
for affinity maturation. In conclusion, the results obtained demonstrate that Con-A UF is
an important source of specific peptides efficient to detect IgG in strongyloidiasis
immunodiagnosis and IgG avidity assay may distinguish active infection with
Strongyloides stercoralis larvae output from suspect or false positive cases.
Palavras-chave
Estrongiloidíase, Strongyloides stercoralis, Glicoproteínas, Avidez, Sorodiagnóstico, Strongyloidiasis, Glycoproteins, Avidity, Serodiagnosis, Estrongiloidíase - Diagnóstico, Diagnóstico diferencial
Citação
GONZAGA, Henrique Tomaz. Reatividade de anticorpos a frações antigênicas de
Strongyloides venezuelensis no diagnóstico diferencial da
estrongiloidíase humana. 2011. 93 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011.