Publicação: Avaliação do antígeno SAG2a recombinante de Toxoplasma gondii como um potencial marcador diagnóstico para Toxoplasmose humana aguda
Carregando...
Arquivos
Tipo do documento
Data
Direito de acesso
Área do conhecimento
CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA::IMUNOLOGIA APLICADA
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Autores
Orientador
Coorientador
Silva, Deise Aparecida de Oliveira
Resumo
Proteínas recombinantes têm sido utilizadas para o diagnóstico sorológico da infecção
por Toxoplasma gondii para diferenciar entre as fases aguda e crônica da toxoplasmose.
Neste estudo, foi avaliada a reatividade de anticorpos IgG e IgG1 através de
imunoensaios em soros de pacientes com toxoplasmose aguda e crônica dirigidos contra
dois antígenos recombinantes clonados e expressos em E. coli, SAG2A (molécula
recombinante total) e SAG2A(DELTA) (molécula recombinante deletada do epítopo
reconhecido pelo anticorpo monoclonal A4D12). A performance de ambos os antígenos
recombinantes foi comparada com o antígeno solúvel de Toxoplasma (STAg). Os
resultados demonstraram uma maior reatividade de anticorpos IgG em amostras de
soros provenientes de pacientes de fase aguda com ambos os antígenos STAg e SAG2A
quando comparados com amostras de soros de fase crônica, sendo esta diferença ainda
mais evidente quando avaliada a reatividade de anticorpos IgG1 para o antígeno
SAG2a. Baixa reatividade foi encontrada para soros humanos de fases aguda e crônica
quando foi utilizado o antígeno SAG2A(DELTA). Uma alta sensibilidade (95%) e alta
especificidade (100%) foram demonstradas pelo ELISA-IgG-SAG2A. Analisando
separadamente a sensibilidade do ELISA-IgG1-SAG2A para as fases aguda e crônica,
foram encontrados valores altamente significantes para a fase aguda (90%) do que para
a fase crônica (67%) da infecção. O ensaio ELISA-IgG avidez utilizando STAg foi
melhor para caracterizar amostras de soros com alta avidez, enquanto que para este
mesmo propósito o ensaio ELISA-IgG1 utilizando SAG2A mostrou melhor
performance. Pode-se concluir que o ELISA-IgG1 utilizando SAG2A mostrou ser
potencial ferramenta de diagnóstico para caracterizar a fase aguda da infecção por T.
gondii, sendo esta a primeira vez que o antígeno SAG2A recombinante é proposto como
um marcador molecular para detectar níveis e avidez de IgG1 e que o epítopo
reconhecido pelo anticorpo monoclonal A4D12 mostrou ser crítico e essencial para sua
aplicação em imunoensaios com finalidades diagnósticas.
Abstract
Recombinant proteins have been used for the serological diagnosis of Toxoplasma
gondii infection to differentiate between the acute and chronic phases of toxoplasmosis.
In this study, we evaluated the reactivity of IgG and IgG1 antibodies by immunoassays
in acute and chronic phase sera from patients with toxoplasmosis against two
recombinant antigens cloned and expressed in E. coli, SAG2A (full recombinant
molecule) and SAG2A(DELTA) (truncated recombinant molecule deleted from the epitope
recognized by A4D12 mAb). The performance of both recombinant antigens was
compared with the soluble Toxoplasma antigen (STAg). Results demonstrated a higher
IgG reactivity in acute sera with both STAg and SAG2A than in chronic phase sera and
this difference was more evident for IgG1 antibodies to SAG2A antigen. Low reactivity
to SAG2A(DELTA) antigen was found in human sera from acute or chronic phases. A high
sensitivity (95%) and specificity (100%) was found for the indirect ELISA-IgGSAG2A.
ELISA-IgG1-SAG2A sensitivity was analyzed separately for acute or chronic
phase, showing values significantly higher for acute (90%) than for chronic (67%)
phases. ELISA-IgG avidity using STAG was better for charactering sera with high
avidity, while the ELISA-IgG1 using SAG2A was the best for this purpose. In
conclusion, ELISA-IgG1-SAG2A may be a potential diagnostic tool to characterize the
acute phase T. gondii infection. This is the first time that recombinat SAG2A antigen
has been proposed as a molecular marker and the epitope recognized by the A4D12
mAb showed to be critical and valuable for application in diagnostic procedures.
Palavras-chave
Toxoplasmose, Toxoplasma gondii, Avidez de anticorpo, Antígeno recombinante, Antígeno SAG2A, Diagnóstico sorológico, Subclasse de IgG, Antibody avidity, IgG subclasses, Recombinant antigen, SAG2A antigen, Serological diagnosis
Citação
BÉLA, Samantha Ribeiro. Avaliação do antígeno SAG2a recombinante de Toxoplasma gondii como um potencial marcador diagnóstico para Toxoplasmose humana aguda. 2007. 92 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2007.