Publicação: Perfil de proteínas expressas no cerebelo de camundongo Balb/c tratados com uma dieta rica em carboidratos e tratados com glibenclamida
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA
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Resumo
O consumo de dietas ricas em carboidratos refinados é um fator determinante para o aumento
do risco de obesidade, podendo levar ao aumento nos níveis de insulina, influenciando a
deposição de gordura corporal. Para tratar condições metabólicas associadas à obesidade, como
o diabetes mellitus tipo 2, medicamentos como a glibenclamida são frequentemente utilizados.
Embora o cerebelo seja mais conhecido por suas funções motoras, estudos recentes sugerem
sua possível participação na regulação metabólica e na resposta a dietas e intervenções
farmacológicas. O presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão diferencial de
proteínas no cerebelo de camundongos Balb/c submetidos a uma dieta rica em carboidratos
refinados, bem como o efeito do tratamento de glibenclamida nesses animais por oito
semanas. Para isso, foi feita a homogeneização do tecido cerebelar em tampão, e o
sobrenadante foi submetido à dosagem de proteína total. Alíquotas de 20 µg de proteína do
sobrenadante foram analisadas em SDS-PAGE 12,5%, sendo o gel corado em solução contendo
Coomassie Blue R. A medida de fator de retenção ou mobilidade relativa das bandas foi feita
usando como base o padrão de massa molecular relativa. A imagem do gel foi processada no
software Scion Image para análise da intensidade da densidade óptica. Os resultados foram
dados como média e desvio padrão e submetidos à análise estatística inferencial utilizando o
teste t, considerando significante p < 0,05, e as proteínas foram preditas com base em revisão
da literatura. O perfil eletroforético das amostras revelou a expressão de oito proteínas no
cerebelo dos animais tratados ou não com a dieta e/ou glibenclamida. Destas, cinco bandas
apresentaram significância estatística, sendo elas P1 (55,8 kDa), P3 (45,4 kDa), P6 (35,4 kDa),
P7 (28,8 kDa) e P8 (26,5 kDa). Para P1 e P3, a glibenclamida reduziu a expressão, enquanto a
dieta aumentou. A expressão de P6 diminuiu com ambos os tratamentos feitos de forma isolada,
enquanto P7 diminuiu apenas com a glibenclamida e P8 aumentou apenas com a dieta. A
predição indicou que as proteínas identificadas desempenham diferentes funções, sendo que a
maioria delas (28,2%) atua em eventos relacionados ao DNA e RNA, e outros eventos (23,1%).
Conclui-se que tanto a dieta rica em carboidratos quanto o tratamento com a glibenclamida
promovem alterações no proteoma cerebelar quando analisados de forma isolada, enquanto sua
associação não resultou em alterações significativas na expressão. Dessa forma, as proteínas
identificadas tornam-se potenciais alvos para investigações proteômicas complementares e
análises futuras in silico, considerando a capacidade da dieta e da glibenclamida de modular
sua expressão.
Abstract
Consuming diets rich in refined carbohydrates is a determining factor in increasing the risk of
obesity, which can lead to increased insulin levels, influencing the deposition of body fat. To
treat metabolic conditions associated with obesity, such as type 2 diabetes mellitus, drugs like
glibenclamide are often used. Although the cerebellum is best known for its motor functions,
recent studies suggest its possible involvement in metabolic regulation and response to diets
and pharmacological interventions. The present study aimed to evaluate the differential
expression of proteins in the cerebellum of Balb/c mice fed a diet rich in refined carbohydrates,
as well as the effect of glibenclamide treatment in these animals for eight weeks. For this
purpose, cerebellar tissue was homogenized in buffer, and the supernatant was subjected to total
protein assay. Aliquots of 20 µg of protein from the supernatant were analyzed by 12.5% SDSPAGE, and the gel was stained with Coomassie Blue R solution. The retention factor or relative
mobility of the bands was measured based on the relative molecular mass standard. The gel
image was processed using Scion Image software to analyze the optical density intensity. The
results were given as mean and standard deviation and submitted to inferential statistical
analysis using the t-test, considering p < 0.05 significant, and the proteins were predicted based
on a review of the literature. The electrophoretic profile of the samples revealed the expression
of eight proteins in the cerebellum of animals treated or not treated with the diet and/or
glibenclamide. Of these, five bands were statistically significant, namely P1 (55.8 kDa), P3
(45.4 kDa), P6 (35.4 kDa), P7 (28.8 kDa), and P8 (26.5 kDa). For P1 and P3, glibenclamide
reduced expression, while the diet increased it. The expression of P6 decreased with both
treatments performed in isolation, while P7 decreased only with glibenclamide and P8 increased
only with the diet. The prediction indicated that the identified proteins perform different
functions, with most of them (28.2%) acting in events related to DNA and RNA, and other
events (23.1%). It is concluded that both a carbohydrate-rich diet and treatment with
glibenclamide promote changes in the cerebellar proteome when analyzed alone, while their
combination did not result in significant changes in expression. Thus, the identified proteins
become potential targets for complementary proteomic investigations and future in silico
analyses, considering the ability of diet and glibenclamide to modulate their expression.
Palavras-chave
Dieta isocalórica, Perfil eletroforético, Sistema nervoso, Isocaloric diet, Electrophoretic profile, Nervous system
Citação
SILVA, Isadora de Lima e. Perfil de proteínas expressas no cerebelo de camundongo Balb/c tratados com uma dieta rica em carboidratos e tratados com glibenclamida. 2026. 30 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Ciências Biológicas) – Universidade Federal de Uberlândia, Ituiutaba, 2026.
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