Publicação: Fator de Inibição da Migração de Macrófagos (MIF) aumenta a migração e a susceptibilidade de células trofoblasticas extravilosas (HTR8/SVneo) à infecção por Toxoplasma gondii
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA
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Resumo
O sucesso da gestação é dependente da produção de muitas citocinas. Algumas
destas citocinas contribuem para a migração de células trofoblásticas
extravilosas, como o fator de inibição da migração de macrófagos (MIF),
importante durante esse processo. MIF é uma citocina potente e está envolvida
na patogênese de diferentes infecções, incluindo a toxoplasmose. Assim,
investigamos o papel de MIF em células trofoblásticas extravilosas, linhagem
HTR8/SVneo, após infecção por Toxoplasma gondii. As células foram
infectadas com taquizoítas da linhagem RH (2F1) de T. gondii e tratadas com
MIF recombinante (rhMIF) ou inibidor de MIF (ISO-1). A viabilidade celular
foi avaliada por ensaio de MTT, a proliferação intracelular de T. gondii pelo
ensaio de β-galactosidase colorimétrica, a expressão de CD44 e fosforilação de
ERK1/2 por Western blott e a migração celular pelo ensaio de scratch. Os
sobrenadantes foram coletados para análise de produção de MIF por ELISA. As
células foram utilizadas para a expressão do co-receptor CD44 e análise da
fosforilação de ERK1/2. A viabilidade celular não foi alterada nas células
infectadas e/ou tratadas com rhMIF ou ISO-1. As células tratadas com rhMIF
apresentaram elevada carga parasitária e maior expressão da fosforilação da
ERK1/2. Além disso, a infecção aumentou a produção de MIF extracelular pelas
células HTR8/SVneo. Em relação ao ensaio de migração celular, as células
tratadas com ISO-1 diminuiram a migração comparadas com as células tratadas
com rhMIF. Assim, a infecção por T. gondii modula a produção de MIF, a
expressão da fosforilação de ERK1/2. Além disso, MIF foi importante na
migração de células HTR8/SVneo, garantindo sua permanência na célula
hospedeira.
Abstract
The successful of pregnancy depend about production of many cytokine by
extravillous trophoblastic cells migration and the macrophage migration
inhibitory (MIF) is important in this process. MIF is a potent cytokine,
implicated in several pathological conditions and it is involved in pathogenesis
of infections, including toxoplasmosis. Therefore, we investigated the role of
MIF in infected HTR8/SVneo cells. The cells were infected with RH strain
(2F1) tachyzoites of T. gondii and treated with recombinant MIF (rhMIF) or
MIF inhibitor (ISO-1). The cell viability was analyzed by MTT assay, T. gondii
intracellular proliferation by colorimetric beta-galactosidase assay, CD44
expression and ERK1/2 phosphorylation by Western blotting and cell migration
by scratch assay. The supernatants were collected for MIF production analysis
by ELISA. The cells were used to CD44 co-receptor and ERK1/2
phosphorylation analysis. Cellular viability was not changed in infected and/or
treated with rhMIF or ISO-1. Cells treated with rhMIF showed high parasite
burden, presence of ERK1/2 phosphorylation. In addition, the infection
increased extracellular MIF production by HTR8/SVneo cells. In cellular
migration assay, ISO-1 treated cells decrease migration compared with rhMIF
treated cells. In conclusion, T. gondii infection caused modulation of MIF
production and ERK1/2 phosphorylation. Furthermore, MIF was important in
the migration of HTR8/SVneo cells, ensuring its permanence in the host cell.
Palavras-chave
Imunologia, Citocinas, Células, Toxoplasma gondii, Fator de Inibição da Migração de Macrófagos (MIF), CD44, Fosforilação da ERK1/2, Migração celular, Macrophage Migration Inhibitor Factor (MIF), ER1/2 phosphorylation, Cell migration
Citação
MILIAN, Iliana Claudia Balga. Fator de Inibição da Migração de Macrófagos (MIF) aumenta a migração e a susceptibilidade de células trofoblasticas extravilosas (HTR8/SVneo) à infecção por Toxoplasma gondii. 2017. 76 f. Dissertação (Mestrado em Imunologia e Parasitologia Aplicadas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2017. DOI http://doi.org/10.14393/ufu.di.2017.536