Publicação: Purificação de uma miotoxina da peçonha de Bothrops neuwiedi pauloensis (Jararaca Pintada) e sua ação sobre o músculo gastrocnemius de camundongos
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Área do conhecimento
CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA
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Autores
Orientador
Coorientador
Hamaguchi, Amélia
Resumo
O presente trabalho teve como objetivo purificar a proteína miotóxica
de Bothrops neuwiedi pauloensis e analisa-la quanto à massa molecular,
atividade fosfolipásica e atividade miotóxica. Duas cromatografias foram
realizadas para que pudéssemos encontrar as melhores condições para
purificar a miotoxina. Na primeira cromatografia realizada em SP-Sephadex
C-25 em tampão acetato de amônio 0,05M pH 5,5 foram encontradas onze
frações protéicas (Nl a N 10), estas foram analisadas quanto ao perfil
eletroforético e atividades biológicas. Mas devido à grande quantidade de sal
existente nas amostras não foi possível trabalhar com este material. Em uma
segunda cromatografia realizada em CM-Sephadex C-25 em tampão
bicarbonato de amônio 0,05M, pH 8,0, foram encontrados seis picos de
absorbância a 280nm designados Pl a Pé. Estas frações foram analisadas,
apresentando um perfil eletroforético satisfatório. A atividade fosfolipásica foi
encontrada apenas no pico Pl. Em géis de poliacrilamida com e sem agentes
desnaturantes a fração PS apresentou banda única semelhante a fosfolipase
A2. Como não foi observada atividade fosfolipásica para a fração PS, testouse a atividade miotóxica. Estudos histológicos mostraram alterações no tecido
muscular estriado esquelético, degeneração, necrose celular e grande
quantidade de leucócitos, caracterizando assim uma inflamação ocasionada
por esta proteina. Com estes resultados pode-se afirmar que a fração P5 é uma
proteína miotóxica de caráter básico, com peso molecular de
aproximadamente 15 kDa e que não apresenta atividade fosfolipase A2 sobre
substrato artificial..
Abstract
Palavras-chave
Miotoxina, Fosfolipase A2, Peçonha de serpente, Bothrops neuwiedi pauloensis, Estudo Histológico
Citação
RODRIGUES, Renata Santos. Purificação de uma miotoxina da peçonha de Bothrops neuwiedi pauloensis (Jararaca Pintada) e sua ação sobre o músculo gastrocnemius de camundongos. 55 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Ciências Biológicas) – Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2001.