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Aplicação simultânea de macerado de carrapato em cultura de células, extração de DNA e RNA, para detecção de microrganismos

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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS

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Carrapatos são ectoparasitas hematófagos pertencentes ao filo Arthropoda, classe Arachnida, ordem Acari e subordem Ixodida. Apresentam grande longevidade e carreiam vírus e bactérias por um longo período de tempo. No Brasil, somente dois vírus em carrapatos foram relatados até o momento, o vírus Cacipacoré (CPCV) e o Mogiana tick virus (MGTV). Dessa forma, este trabalho teve como objetivo principal utilizar a cultura de células de linhagem Vero para a detecção de vírus que possam estar presentes em amostras de carrapatos da espécie Rhipicephalus microplus provenientes de hospedeiros bovinos. A metodologia aplicada visou otimizar um protocolo padrão para a utilização simultânea das amostras tanto em cultivo celular quanto em procedimentos de biologia molecular. A presença de efeito citopático (ECP) nos cultivos celulares foi observada, inferindo possível contaminação por vírus, e tal hipótese foi duplamente reforçada através de testes como extração de DNA positiva para o gene 16S e extração de RNA das células inoculadas indicando presença de segmentos de RNA ribossômico. O emprego dessa metodologia para detecção viral poderá ser vantajoso, uma vez que a detecção por métodos moleculares, como a RT- PCR, é específica para determinada (o) espécie ou gênero viral e essa especificidade demanda um conhecimento prévio que ainda é considerado precário ao se tratar de vírus presentes em carrapatos no país.

Abstract

Palavras-chave

Carrapatos, Vírus, Cultura de células

Citação

SOUZA, Ana Flávia Dutra. Aplicação simultânea de macerado de carrapato em cultura de células, extração de DNA e RNA, para detecção de microrganismos. 2019. 16 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biotecnologia) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2020.

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