Publicação: Estabelecimento in vitro, aclimatização e conservação in vitro de
Lippia alba (Mill.) N. E. Brown (Verbenaceae)
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CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::AGRONOMIA
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O presente trabalho teve por objetivo promover o estabelecimento in vitro, a
aclimatização e a conservação in vitro de Lippia alba (Mill.) N. E. Brown. Para isso, foi
testada a influencia de diferentes concentrações e diferentes tempos de imersão de
hipoclorito de sódio na assepsia dos explantes. Segmentos nodais foram imersos em
hipoclorito de sódio em diferentes concentrações (0,4; 0,6; 0,8 e 1,0 %) e por diferentes
tempos (8, 12 e 16 min.), após 30 dias avaliou-se a contaminação bacteriana (%),
número de brotos, número de folhas e sobrevivência (%). A concentração de 1% de
hipoclorito de sódio foi mais eficiente no controle da contaminação. Também foi testada
a influência do antibiótico cefotaxima sódica incorporada ao meio MS para evitar a
contaminação. Segmentos nodais foram inoculados em meio MS contendo diferentes
doses de cefotaxima sódica (0, 50, 100, 150 e 200 mg/L-1), aos 30 dias avaliou-se a
contaminação bacteriana (%), a oxidação (%) e a sobrevivência (%). A dose de 200 mg
L-1 de cefotaxima evitou totalmente a contaminação. Ápices caulinares de Lippia alba
foram estabelecidos in vitro em meio MS complementado com diferentes doses de BAP
(0; 0,5; 1,0; 1,5 mg L -1). Após 140 dias, avaliou-se a contaminação (%), a
sobrevivência (%), a oxidação (%) e o número de brotos. Os melhores resultados foram
obtidos quando foi utilizada a dose 1,5 mg L -1. Para a aclimatização, foram testados
quatro tipos de substratos: Pó de coco + calcário (1g. L-1), Plantmax® + calcário (1g.L-
1), Vermiculita + calcário (1g.L-1) e Pó de coco + Plantmax® + Vermiculita (1:1:1) +
calcário (1g.L-1). Avaliou-se a sobrevivência (%), o comprimento da parte aérea (cm),
comprimento da raiz (cm), a massa fresca da parte aérea e da raiz (g) e a massa seca da
parte aérea e da raiz (g). Os melhores resultados foram obtidos quando se utilizou o
substrato comercial Plantmax®. Para estabelecer o banco de germoplasma da espécie,
segmentos nodais foram isolados de plântulas desenvolvidas in vitro e inoculados em
diferentes meios de cultura: T1 (MS + 2% sacarose + 4% de sorbitol); T2 (MS + 2%
sacarose + 4% de sorbitol + 2 mgL-1 pantotenato de cálcio); T3 (MS + 2% sacarose +
3% de manitol + 2 mgL-1 pantotenato de cálcio); T4 (MS/2 + 2% sacarose + 4% de
sorbitol); T5 (MS/2 + 2% sacarose + 4% de sorbitol + 2 mgL-1 pantotenato de cálcio) e
T6 (MS/2 + 2% sacarose + 3% de manitol + 2 mgL-1 pantotenato de cálcio); e 4
repetições, sendo cada repetição constituída por cinco tubos de ensaio com um explante
cada. Avaliou-se a sobrevivência (%), explantes com brotação (%), número de brotos,
número de raiz e a altura dos brotos, as avaliações foram realizadas aos 45, 60, 75 e 90
dias após inoculação. O meio T6 (MS/2 + 2% sacarose + 3% de manitol + 2 mgL-1
pantotenato de cálcio) é o mais indicado para conservação de Lippia alba in vitro.
Abstract
This study analyzed in vitro establishment, acclimatization and conservation of Lippia
alba (Mill.) N. E. Brown. For this purpose, the effect of different concentrations and
dipping times of sodium hypochloride in sterile explants was tested. Nodal segments
were immersed in sodium hypochloride at different concentrations (0.4, 0.6, 0.8 and
1.0%) and different times (8, 12 and 16 min). After 30 days of incubation bacterial
contamination (%), number of shoots, number of leaves and survival (%) were
evaluated. The concentration of 1% sodium hypochloride was more effective in
controlling contamination. Also the effect of the antibiotic cefotaxime sodium
incorporated into the MS medium, to avoid contamination, was tested. Nodal segments
were inoculated on MS medium containing different doses of cefotaxime sodium (0, 50,
100, 150 and 200 mg L-1) and 30 days later were evaluated for bacterial contamination
(%), oxidation (%) and survival (%). The dose of 200 mg L-1 cefotaxime completely
avoided contamination. Shoot tips of Lippia alba were established in vitro on MS
medium supplemented with different concentrations of BAP (0, 0.5, 1.0, 1.5 mg L-1).
Contamination (%), survival (%), oxidation (%) and the number of shoots were
evaluated after 140 days growth. The best result was obtained with 1.5 mg L-1 of BAP.
For acclimatization, four types of substrates were tested: Powder coconut + lime (1g L-
1), Plantmax ® + lime (1g L-1), vermiculite + lime (1g L-1) and coconut powder +
Plantmax ® +vermiculite (1:1:1) + lime (1g L-1). Survival (%),shoot length (cm), root
length (cm), fresh weight of shoot and root (g) and dry weight of shoot and root (g)
were evaluated The best result was obtained when using the substrate Plantmax ®. In
order to establish a germplasm bank of the species, nodal segments were isolated from
in vitro grown seedlings and inoculated in different culture media: T1 (MS + 2%
sucrose + 4% sorbitol), T2 (MS + 2% sucrose + 4% sorbitol + 2 mg L-1 calcium
pantothenate), T3 (MS + 2% sucrose + 3% mannitol + 2 mg L-1 calcium pantothenate),
T4 (MS / 2 + 2% sucrose + 4% sorbitol); T5 (MS / 2 + 2% sucrose + 4% sorbitol + 2
mg L-1 calcium pantothenate) and T6 (MS / 2 + 2% sucrose + 3% mannitol + 2 mg L-1
calcium pantothenate) with 4 replicates, each one consisting of five test tubes with one
plant each. Survival (%), explants with shoots (%), number of shoots, root number and
height of shoots, were evaluated at 45, 60, 75 and 90 days after inoculation. The
medium T6 (MS / 2 + 2% sucrose + 3% mannitol + 2 mgL-1 calcium pantothenate) was
the most suitable for in vitro conservation of Lippia alba.
Palavras-chave
Lippia alba, Hipoclorito de sódio, Cefotaxima sódica, Ápices
caulinares, Sodium hypochloride, Cefotaxime sodium, Shoot tips, Biotecnologia vegetal, Tecidos vegetais - Cultura e
meios de cultura
Citação
SANTOS, Verônica Araújo. In vitro establishment, acclimatization and
conservation of Lippia alba (Mill.) N. E. Brown (Verbenaceae).. 2010. 37 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Agrárias) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2010.