Publicação: Fator foxo e sinalização nutricional na reprodução de Blatella germânica
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA
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Coorientador
Maestro, José Luis
Resumo
CAPITULO II: A barata Blattella germanica é um clássico modelo de estudo de
vitelogeneses dependente HJ os experimentos realizados com este inseto
confirmam que é um inseto anautogenico, sendo que se este não come não
se desenvolve seus oocitos Esse animal possui um período de 8 dias como
adulto no qual ocorrem transformações reprodutivas, como crescimento dos
oocitos e maturação dos mesmo assim como mudanças na alimentação na
B. germânica. Tanto a expressão gênica como a reprodução vem sendo
bastante estudados nos insetos e os resultados indicam que estes processos
passam pela ativação da via do IR e, também, pela ativação da via do gene
target of rapamycin (TOR). Ambas as vias estão correlacionadas e sabe se
que realizam uma ponte entre o estado larval a ativação metabólica e o
crescimento das células. O fator de transcrição FOXO e um dos principais
substratos da proteína quinasa Akt em resposta a estimulação celular por
fatores de crescimento ou insulina. Com a clonagem de FOXO em B.
germânica, com o objetivo obter a seqüência completa e de estudar sua
regulação por transcrição, realizamos ciclos de expressão de mRNAs para
diferentes tecidos e diferentes fatores da via de insulina FOXO, target of
rapamycin (TOR), receptor de insulina (IR), S6K, vitelogenina (Vg),
hidroximetilglutamil-CoA sintasa (SIN) e hidroximetilglutamil-CoA-reductasa
(RED) em três tecidos diferentes, corpora allata (CA), ovário (OV) e corpo
gorduroso (CG), via técnica de RT-PCR e Southern Blot para quantificar a
expressão, sendo que os transcritos demonstraram, diferentes padrões de
expressão para os diferentes tecidos, assim também analisamos o fator
alimentação para diferentes dias de adulto comprovando uma diferente
expressão dos transcritos entre animais alimentados e não alimentados. CAPITULO III: Neste capitulo descrevemos um estudo funcional do fator de transcrição
FOXO, utilizando a técnica RNAi in vivo. Este trabalho tenta estudar o papel
de FOXO durante a fase de ninfa, e sua transição a fase adulta da B.
germanica inseto modelo, visto que neste momento de mudança de fases se
produzem mudanças morfológicas e fisiológicas importantes. Outro motivo
para realizar o estudo seria que quando a B. germânica entra na fase adulta
se determina a mudança do programa genético e se inicia uma serie de
processos que são exclusivos desta fase. Com o tratamento de fêmeas de B.
germânica com dsRNA in vivo para FOXO (DsFOXO) foi possível verificar
uma redução dos níveis de mRNAs para FOXO tanto no CG como no OV, o
que sugere um efeito sistêmico para o tratamento. O tratamento de DsFOXO,
com a condição de presença ou ausência de alimento foi possível observar
que, tanto no CG como no OV, a ausência de alimento produziu um aumento
de mRNA para FOXO, incluindo no caso de interferir a expressão de FOXO
utilizando dsRNA.
Abstract
Palavras-chave
Blattella germanica, FOXO, TOR, IR, S6K, Vg SIN, RED
RT-PCR, Southern Blot, regulação por transcrição, RNAi in vivo, Biologia molecular
Citação
CÔBO, Juliana Almeida. Fator foxo e sinalização nutricional na reprodução de Blatella germânica. 2008. 109 f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2008.