Publicação: Efeitos in vivo e in vitro da lectina de Synadenium carinatum sobre a infecção murina por Leishmania (Leishmania) amazonensis
Carregando...
Arquivos
Tipo do documento
Data
Direito de acesso
Área do conhecimento
CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Orientador
Coorientador
Souza, Maria Aparecida de
Resumo
Introdução: As leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero
Leishmania, parasitos intracelulares de macrófagos, que se manifestam sob formas clínicas
diversas. A resposta imune celular é a resposta protetora efetiva contra estes parasitos
intracelulares. Lectinas de plantas são capazes de induzir a produção, por células
mononucleares murinas, de IFN-γ, IL-12 e TNF-α, moléculas importantes em uma resposta
celular Th1, requerida para o controle destas parasitoses.
Objetivos: Analisar o efeito biológico da lectina de Synadenium carinatum (ScLL),
associada ou não ao antígeno solúvel de Leishmania (SLA), sobre a infecção murina por L.
(L.) amazonensis, avaliando seu perfil imunoestimulatório na lesão cutânea e em cultura de
macrófagos.
Materiais e Métodos: Para avaliar o potencial adjuvante de ScLL, grupos de cinco
camundongos foram imunizados com diferentes concentrações desta lectina , associadas ou
não ao SLA. A infecção destes animais com 10000000 promastigotas de L. (L.) amazonensis foi
monitorada semanalmente pela medida da pata infectada durante 10 semanas, quando
foram avaliadas as respostas celular e humoral por meio de DTH e ELISA,
respectivamente, como também a expressão das citocinas IFN-γ, IL-4, IL-12, TNF-α e
iNOS no local da lesão. O efeito imunoestimulatório de ScLL foi avaliado em cultura de
macrófagos peritoneais murinos estimulados com esta lectina após 24, 48 e 72 horas de
infecção por L. (L.) amazonensis, quando os sobrenadantes de cultura foram colhidos para
determinação da produção de NO e IL-12. A expressão gênica de citocinas como IL-1β,
IL-12, TNF-α e iNOS e a carga parasitária intracelular foram analisados após 24, 48 e 72
horas de infecção.
Resultados: A lectina ScLL, na concentração de 10 μg/ml foi capaz de estimular a
expressão das citocinas IL-1β, TNF-α e iNOS, in vitro, bem como de reduzir, de modo
significativo, a proliferação de parasitos no interior de macrófagos. In vivo, esta lectina foi
capaz de proteger parcialmente os camundongos imunizados, controlando o
desenvolvimento da lesão e induzindo a expressão das citocinas, IFN-γ, IL-12, TNF-α e
iNOS. Altos níveis de IgG2a e baixos de IgG1 foram detectados nos soros dos animais
imunizados, sendo correlacionados com o controle da infecção.
Conclusões: A lectina ScLL conferiu proteção parcial aos animais imunizados após desafio
por L. (L.) amazonensis, induzindo um perfil de resposta imune capaz de controlar o
parasitismo in vivo e in vitro. Em conjunto, os dados obtidos com ScLL sugerem que pode
vir a ser utilizada como adjuvante em modelos experimentais de vacinação contra L. (L.)
amazonensis.
Abstract
Introduction: Leishmaniasis are illnesses caused by protozoan of the genus Leishmania,
intracellular parasites of macrophages, that appears under diverse clinical forms. The
cellular immune response is the effective protective response against these intracellular
parasites. Lectins are capable to induce the production, by murine mononuclear cells, of
interferon gamma (IFN - γ ), IL-12 and TNF-α, important molecules in an immune response
for a Th1 profile, required to control this parasitism.
O
bjectives: To analyze the biological effect of the latex lectin of the Synadenium
carinatum (ScLL), associate or not to the soluble Leishmania antigen (SLA), on the murine
infection by L. (L.) amazonensis, evaluating its immunostimulating profile in cutaneous
lesions and in infected macrophages.
Materials and Methods: To evaluate the adjuvant potential of ScLL, groups of five mice
had been immunized with different concentrations of this lectin associated or not to SLA.
The infection of these animals was monitored weekly by measuring the infected paw during
10 weeks, when were evaluated the cellular and humoral immune responses through DTH
and ELISA, respectively, as well as the expression of the IFN-γ, IL-4, IL-12, TNF-α and
iNOS cytokines in the place of the lesion. The immunostimulating effect of ScLL was
evaluated in culture of murine peritoneal macrophages stimulated with this lectin after 24,
48 and 72 hours of infection by L (L.) amazonensis, when the culture supernatants were
harvested for the determination of NO and IL-12 production. The genic expression of
cytokines as IL-1β, IL-12, TNF- α and iNOS and the intracellular parasitic load were
analyzed 24, 48 and 72 hours after infection.
Results: The ScLL lectin, in the concentration of 10 μg/ml was capable to stimulate the
expression of IL-1β, TNF-α and iNOS cytokines, in vitro, as well as reducing in a
significant way, the proliferation of parasites in the interior of macrophages. In vivo, this
lectin was capable to protect the immunized mice partially, controlling the development of
the lesion and inducing the expression of IFN-γ, IL-12, TNF-α and iNOS cytokines. High
levels of IgG2a and low levels of IgG1 were detected in the serum of the immunized
animals, being correlated with the control of the infection.
Conclusions: The ScLL lectin conferred partial protection to the animals immunized after
challenge with L. (L.) amazonensis, inducing a profile of immune response capable to
control the parasitism in vivo e in vitro. Jointly, the data obtained with ScLL suggests that it
can be used as adjuvant in experimental models of vaccination against L. (L.) amazonensis.
Palavras-chave
L. (L.) amazonensis, Synadenium carinatum, Lectina, Adjuvante, Infecção murina, Leishmania amazonensis, Lectin, Adjuvant, Murine infection, Leishmaniose
Citação
CARDOSO, Sandra Regina Afonso. Efeitos in vivo e in vitro da lectina de Synadenium carinatum sobre a infecção murina por Leishmania (Leishmania) amazonensis. 2006. 121 f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2006.