Publicação: O microRNA bta-miR-425-5p adquirido pelo espermatozoide durante o processo de maturação no epidídimo
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS
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Orientador
Coorientador
Silveira, Juliano Coelho da
Resumo
Os miRNAs desempenham papéis fundamentais na função celular por meio da regulação de
diferentes vias. As células espermáticas podem entregar miRNAs ao oócito, modulando os
futuros processos epigenéticos do embrião. Em particular, o miR-425-5p descrito como um
marcador de proliferação celular e é conhecido por estar presente no esperma. Este trabalho
teve como objetivo determinar e quantificar se o bta-miR-425-5p, encontrado no esperma
bovino, origina-se da espermatogênese ou é incorporado durante a maturação epididimal. Para
isso, testículos de touros foram obtidos de um abatedouro local para obter espermatozoides,
vesículas extracelulares e amostras de tecido do parênquima testicular, cabeça, corpo e cauda
epididimal de 22 testículos. As amostras foram coletadas por dissecação e lavagem com PBS
1X. As vesículas extracelulares foram caracterizadas por microscopia eletrônica, análise de
rastreamento de nanopartículas e citômetro de fluxo. Além disso, foi quantificado a expressão
de bta-miR-425-5p por RTq-PCR em vesículas extracelulares, espermatozoides e amostras de
tecido do testículo e dos diferentes segmentos epididimários. Os resultados demonstram a
presença de vesículas extracelulares e diferenças em tamanho e concentração para cada região.
O tamanho das vesículas extracelulares diminuiu, sendo as maiores nos testículos e as menores
na cauda epididimal, com maior concentração nos testículos do que nas diferentes regiões do
epidídimo. Mesmo na quantificação da expressão de bta-miR-425-5p, foi expresso nos túbulos
seminíferos e ductos epididimários, e significativamente diferente nas vesículas extracelula res
e esperma da cauda epididimal. De maneira geral, este trabalho demonstrou que o bta-miR-425-
5p poderia ser adicionado aos espermatozoides durante a maturação e essa agregação pode ser
mediada por vesículas extracelulares.
Abstract
MiRNAs play key roles in cell function through the regulation of different pathways. Sperm
cells can deliver miRNAs to the oocyte modulating the embryo's future epigenetic processes.
Particularly miR-425-5p, is well described as a cellular proliferation marker and is known to be
present in sperm. This work aimed to determine and quantify whether bta-miR-425-5p, found
in bovine sperm, originates from spermatogenesis or is incorporated during epididyma l
maturation. For that bull, the testis-epididymis complex was obtained from a local
slaughterhouse to obtain sperm, extracellular vesicles, and tissue samples from the testicular
parenchyma, epididymal head, body, and tail from 22 testes. Samples were collected by
dissection and flushing with 1xPBS. Extracellular vesicles were characterized by TEM,
nanoparticle tracking analysis, and flow cytometer, in addition, the expression of bta-miR-425-
5p in extracellular vesicles, sperm, and tissue samples from different epididymal segments and
the testis was quantified by RT-qPCR. The results demonstrate the presence of extracellular
vesicles and differ in size and concentration for each region, the size of the extracellular vesicles
decreased, the largest in the testis and smallest in the epididymal cauda, with greater
concentration in the testicles than in the different regions of the epididymis. Even in quantifying
the expression of bta-miR-425-5p, this was expressed in the seminiferous tubules and
epididymal ducts, and significantly different expressed in the extracellular vesicles and sperm
of the epididymal cauda. Overall, this work demonstrated that bta-miR-425-5p was added to
spermatozoa during maturation and this aggregation could be mediated by extracellular
vesicles.
Palavras-chave
microRNA, microRNA, miR-425-5p, miR-425-5p, Espermatozoide, Sperm, Vesícula extracelular, Extracellular vesicle
Citação
ROJAS, Yulizabeth Daniela Pinto. O microRNA bta-mir-425-5p adquirido pelo espermatozoide durante o processo de maturação no epidídimo. 2024. 66 f. Dissertação (Mestrado em Biologia Celular e Estrutural Aplicadas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2024. DOI http://doi.org/10.14393/ufu.di.2024.5145.