Publicação: Mecanismos de sinalização celular envolvidos nos processos de
proliferação e propagação de Ehrlichia canis in vitro
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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA::IMUNOLOGIA APLICADA
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Ehrlichia canis, agente etiológico da Erliquiose Monocítica Canina, é uma bactéria
intracelular obrigatória que se aloja em monócitos e macrófagos. Nesse estudo analisamos o
papel do citoesqueleto, especificamente filamentos de actina e microtúbulos, de alguns
componentes da Via de Sinalização celular IP3/DAG: fosfolipase C (PLC), proteína quinase
(PTK) e canais de cálcio, além do ferro nos processos de proliferação e propagação de E.
canis em células DH82. Para cada um desses componentes utilizamos diferentes drogas
inibitórias: Citocalasina D (inibe a polimerização de filamentos de actina); Nocodazol (inibe a
polimerização dos microtúbulos); Neomicina (inibidor de PLC); Genisteína (inibidor de
PTK); Cloridrato de Verapamil (bloqueador de canal de cálcio) e Deferoxamina (quelante de
ferro). Quanto ao Processo de Proliferação, observou-se diminuição significativa do número
total de bactérias nas células tratadas. Exceto para Genisteína (29.86%) e Nocodazol
(38.53%), a porcentagem de células infectadas apresentou-se significativamente menor em
comparação ao controle (33.23%). Quanto ao Processo de Propagação, exceto para
Nocodazol, houve uma queda do número total de bactérias após o tratamento. Quanto à
porcentagem de células infectadas, não houve diferença significativa para as células tratadas
com Citocalasina D (44.72%) e Deferoxamina (56.53%) em relação ao controle (51.67%). Em
relação ao Nocodazol, foi evidenciado aumento significativo na porcentagem de células
infectadas (64.75%). Esses resultados sugerem que os processos de proliferação e propagação
de E. canis são sensiveis às drogas testadas, demonstrando que a polimerização do filamentos
de actina, em comparação aos microtúbulos, bem como a participação dos componentes da
Via de Sinalização IP3/DAG (PLC, PTK e canais de cálcio) analisados e do ferro são
essenciais à multiplicação bacteriana.
Abstract
Ehrlichia canis, etiologic agent of Canine Monocytic Ehrlichiosis, is an obligatory
intracellular bacteria that lodges itself in monocytes and macrophages. In this study we
analyzed the role of the cytoskeleton, specifically actin and microtubules, some components
of the signaling pathway IP3/DAG: phospholipase C (PLC), protein kinase (PTK) and
calcium channels as well as the role of iron in the processes of proliferation and propagation
of E. canis in DH82 cells. For each of these components different inhibitory drugs were used:
Cytochalasin D (inhibits actin polymerization), Nocodazole (inhibits microtubule
polymerization), Neomycin (PLC inhibitor), Genistein (PTK inhibitor), Verapamil
hydrochloride (blocker calcium channel) and Deferoxamine (iron chelator). Regarding to
proliferation process, we observed a significant decrease in the total number of bacteria in
treated cells. Except for Genistein (29.86%) and Nocodazole (38.53%), the percentage of
infected cells was significantly lower compared with the control (33.23%). As for the
propagation process, except for Nocodazole, there was a decrease in the total number of
bacteria after treatment. In relation to infected cells percentage, no significant difference were
seen in treated cells with Cytochalasin D (44.72%) and Deferoxamine (56.53%) when
compared to controls (51.67%). Regarding Nocodazole was evidenced significant increase in
the percentage of infected cells (64.75%). These results suggest that E. canis proliferation and
spread are sensitive to tested drugs, demonstrating that actin filaments polymerization,
compared to microtubules, as well as the components envelopment of signaling pathway
IP3/DAG (PLC, PTK and calcium channels) analyzed and iron are essential to bacterial
multiplication
Palavras-chave
Células DH82, Ehrlichia canis, Sinalização celular, DH82 cells, Cell signaling, Erliquiose, Zoonoses
Citação
LEVENHAGEN, Marcelo Arantes. Mecanismos de sinalização celular envolvidos nos processos de
proliferação e propagação de Ehrlichia canis in vitro. 2011. 53 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011.