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Fragmentação do DNA espermático identificada pelo teste de Nicoletti e sua correlação com a eficiência da produção in vitro de embriões bovinos

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CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS, CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA::REPRODUCAO ANIMAL

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Resumo

Atualmente, a maioria dos sêmens utilizados em biotecnologias reprodutivas são submetidos apenas ao espermograma de rotina. No entanto, frequentemente existem casos em que o sêmen é classificado como “normal”, porém os resultados obtidos nas biotecnologias são insatisfatórios. Isso pode ser explicado pela presença de alterações na cromatina espermática que não são detectadas pelo espermograma e que comprometem aspectos como a capacidade fecundante dos espermatozoides e o desenvolvimento embrionário. Existem diversos métodos para identificar essas alterações, sendo considerado o método “ouro” o “Sperm Chromatin Structure Assay” (SCSA), o qual nem sempre têm resultados satisfatórios. Recentemente o teste de Nicoletti, desenvolvido originalmente para análise de fragmentação de DNA (apoptose) de células somáticas, foi sugerido como alternativa ao SCSA. Nesse trabalho, objetivou-se verificar a relação entre as alterações de cromatina espermática identificada pelo teste de Nicoletti e a eficiência da produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos. Nove amostras de sêmen bovino de diferentes níveis de fertilidade foram submetidas ao teste de Nicoletti e utilizadas em rotinas de PIVEs. Foram calculadas as taxas médias de clivagem, blastocisto e desenvolvimento embrionário de cada amostra de sêmen. Posteriormente foi realizado o teste de correlação de Pearson entre os resultados obtidos pelo teste de Nicoletti e as taxas das PIVEs. A única correlação significativa encontrada foi negativa e entre o teste de Nicoletti e a taxa de clivagem. Esta taxa está relacionada com a capacidade fecundante dos espermatozoides. É sabido que as alterações leves na cromatina espermática geralmente não interferem na capacidade fecundante dos espermatozoides, mas interfere no desenvolvimento embrionário. Ao contrário das alterações cromatínicas severas, que alteram a morfologia da cabeça, alterando a hidrodinâmica e consequentemente, interferindo na capacidade fecundante dos espermatozoides. Assim, foi possível concluir que o teste de Nicoletti, quando utilizado na avaliação da cromatina de espermatozoides de touro, identifica principalmente alterações da cromatina espermática severas, não sendo uma boa alternativa para o SCSA.

Abstract

Palavras-chave

Cromatina Espermática, Iodeto de Propídio, Citometria de Fluxo, Espermatozoide, Fertilidade, Desenvolvimento Embrionário

Citação

LEITE, Felipe Rosalino. Fragmentação do DNA espermático identificada pelo teste de Nicoletti e sua correlação com a eficiência da produção in vitro de embriões bovinos. 2024. 19 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biotecnologia) – Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2024.

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