Publicação: Avaliação do perfil imunorreativo de peptídeos recombinantes
selecionados por Phage Display contra IgG humana de pacientes com a
doença de Chagas crônica
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CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE
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Resumo
A doença de Chagas foi descoberta e descrita por Carlos Chagas em 1909, e
representa uma importante doença parasitária crônica causada pelo
protozoário flagelado Trypanosoma cruzi. Depois de adquirida, a
tripanossomíase americana pode apresentar-se sob duas fases: aguda e
crônica, sendo esta dividida em três formas principais: indeterminada, digestiva
e cardíaca. Objetivamos avaliar o perfil imunorreativo de peptídeos
recombinantes selecionados contra IgG humana purificada de pacientes com
as formas cardíaca, digestiva e indeterminada da fase crônica da doença de
Chagas por Phage Display, a fim de avaliar a possibilidade de um padrão
diferenciado de resposta imunológica entre as três formas da doença e buscar
clones com potencial diagnóstico. Os ELISAs foram realizados com todos os 50
clones distintos obtidos pelos quatro ciclos de seleção, utilizando-se
sobrenadante dos fagos como antígenos no sistema de captura. Além disso, foi
realizado teste de redução em placas com os clones com melhor desempenho
de reatividade nos ELISAs, a fim de demonstrar a especificidade de ligação dos
anticorpos com esses epítopos. Os testes realizados demonstraram que o perfil
imunorreativo de alguns clones sugere a propensão de indivíduos portadores
da forma indeterminada a evoluírem para a forma cardíaca ou digestiva da
doença, além de demonstrarem clones potenciais para o diagnóstico diferencial
entre as formas cardíaca e digestiva, bem como epítopos para detecção geral
da doença de Chagas.
Abstract
Chagas disease, an American trypanosomiasis caused by Trypanosoma cruzi,
was discovered by Carlos Chagas in 1909, and presents a broad spectrum of
clinical manifestations, including the acute and chronic phases. The latter is
divided into three main forms: digestive, cardiac and indeterminate. The
purposes of this study were to evaluate the immunoreactivity profile of
recombinant peptides selected against purified human IgG from chronic chagas
disease patients by Phage Display, to assess differential recognition patterns in
the immune response among disease clinical forms, and to select mimotopes
with potential use in diagnostics. The enzyme-linked immunosorbent assay
(ELISA) was conducted with all 50 clones obtained after four rounds of
selection. The trials were performed with phages supernatant. In order to
evaluate the specific antibody response, plaque reduction tests were performed
with clones that showed better performance in ELISAs. ELISA tests showed
that the immune profile of some clones suggested the tendency of patients with
the indeterminate form to develop cardiac or digestive form. Phage display
approach has generated specific mimotopes that present differential recognition
patterns of the immune response between the cardiac and digestive clinical
forms of Chagas disease, and these mimotopes may become potential targets
for vaccine development and for differential diagnostics of clinical forms.
Palavras-chave
Doença de Chagas, Peptídeos, Fase crônica, Diagnóstico, Chagas disease, Peptides, Chronic phase, Diagnosis, Chagas, Doença de
Citação
MESSIAS, Flávia Figueira. Evaluation of the Immunoreactivity Profile of Recombinant Peptides
selected by Phage Display against Human IgG from Chronic Chagas
Disease Patients. 2010. 65 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2010.